烏桃果膠裂解酶基因(PpPL)的克隆及其在花色苷降解中的作用.pdf

1、烏桃幼果果皮呈烏黑色，果肉呈紫紅色，隨著果實(shí)的發(fā)育，果皮逐漸褪為紅色，果肉則褪為淺紅色甚至無(wú)色。推測(cè)烏桃果實(shí)的褪色是花色苷降解的結(jié)果?；ㄉ詹环€(wěn)定，易受溫度、光照、pH值、氧及過(guò)氧化物、酶等影響而發(fā)生降解。植物體在生長(zhǎng)過(guò)程中花色苷的降解受多種酶基因調(diào)控，果膠裂解酶是其中一種。
　　本研究以烏桃為試驗(yàn)材料，以川中島白桃為對(duì)照，分析了烏桃果實(shí)成熟過(guò)程中可溶性固形物、還原糖、可滴定酸、果實(shí)硬度及花色苷含量的變化，并從烏桃果肉中克隆了Pp

2、PL基因，利用qRT-PCR技術(shù)分析了PpPL基因的表達(dá)情況，以期在分子水平上進(jìn)一步解析烏桃果實(shí)生長(zhǎng)過(guò)程中的褪色機(jī)理。具體研究結(jié)果如下：
　　1.果實(shí)成熟過(guò)程中，烏桃與川中島白桃在可溶性固形物和還原糖含量的變化趨勢(shì)上基本一致，在含量上烏桃均低于川中島白桃；烏桃含酸量略高于川中島白桃；烏桃與川中島白桃硬度相差較小，只有在果實(shí)成熟末期烏桃軟化稍明顯；烏桃果實(shí)花色苷含量隨果實(shí)的成熟而降低，川中島白桃隨著成熟度的增加果心逐漸現(xiàn)紅色。

3、>　　2.根據(jù)已報(bào)告的桃PpPEL2基因（EF568780）序列設(shè)計(jì)特異性引物PpPL-F、PpPL-R成功從烏桃果肉中克隆出PpPL基因，長(zhǎng)度為1378bp，包括1219bp的開(kāi)放閱讀框，編碼406個(gè)氨基酸。
　　3.利用qRT-PCR檢測(cè)PpPL在果實(shí)不同成熟度及不同組織中的表達(dá)，結(jié)果顯示，烏桃PpPL基因的表達(dá)量隨著果實(shí)的成熟及花色苷的降解呈現(xiàn)遞增的趨勢(shì)，且在果實(shí)成熟末期表達(dá)量明顯增多；不同組織中PpPL基因均有表達(dá)，同一成