小腸粘膜下層復(fù)合成骨誘導(dǎo)的脂肪干細(xì)胞體內(nèi)成骨修復(fù)骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　 研究制備具有成骨活性的仿生性骨膜,植入骨缺損區(qū)修復(fù)骨缺損,為解決骨缺損修復(fù)提供新的思路,進(jìn)而為臨床的實(shí)際應(yīng)用,最終代替自體骨及異體骨移植修復(fù)骨缺損提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 應(yīng)用組織工程的技術(shù)方法,以組織學(xué)、免疫組織化學(xué)與動物實(shí)驗(yàn)學(xué)相結(jié)合的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。選定脂肪干細(xì)胞(ADSCs)作為種子細(xì)胞,體外成骨誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞,對其生物學(xué)特性進(jìn)行檢測,通過細(xì)胞的形態(tài)學(xué)、堿性磷酸酶活性、茜素紅染色、

2、vonKossa染色等技術(shù)指標(biāo)鑒定其向成骨方向分化。將成骨誘導(dǎo)的脂肪干細(xì)胞與作為支架材料的小腸粘膜下層(SIS)在體外復(fù)合培養(yǎng)構(gòu)建出具有功能的細(xì)胞一材料復(fù)合體,制成仿生性骨膜,植入裸鼠皮下,通過組織學(xué)、透射電鏡、免疫組織化學(xué)觀察成骨情況及兩者的細(xì)胞相容性。最后建立節(jié)段性骨缺損動物模型,將仿生性骨膜植入骨缺損區(qū)修復(fù)骨缺損,通過X線攝片、組織形態(tài)學(xué)檢測等方法鑒定其成骨機(jī)制與自體骨膜移植成骨的相似性,確定仿生骨膜修復(fù)骨缺損的效果。
　　

3、 結(jié)果:
　　 體外分離培養(yǎng)擴(kuò)增兔脂肪干細(xì)胞,經(jīng)成骨誘導(dǎo)后可表達(dá)成骨細(xì)胞表型。成骨誘導(dǎo)的脂肪干細(xì)胞與SIS復(fù)合培養(yǎng)可構(gòu)建出具有生理骨膜結(jié)構(gòu)和功能的仿生骨膜,植入裸鼠體內(nèi)可形成具有良好血運(yùn)的新生骨組織。仿生骨膜修復(fù)兔節(jié)段性骨缺損效果良好,其成骨機(jī)制與自體骨膜移植成骨類似。
　　 結(jié)論:
　　 兔脂肪干細(xì)胞體外成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)可轉(zhuǎn)化為成骨細(xì)胞,可表達(dá)成骨細(xì)胞表型,為脂肪干細(xì)胞作為骨組織工程的種子細(xì)胞提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。SIS

4、與脂肪干細(xì)胞構(gòu)建的仿生骨膜在動物實(shí)驗(yàn)的效果,確定了SIS作為支架材料為組織工程骨的新陳代謝提供了良好的環(huán)境,說明兩者具有良好的細(xì)胞生物相容性。仿生骨膜可修復(fù)兔長段骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究,使組織工程骨膜移植有望成為修復(fù)大段骨缺損的有效手段。意義近年來,組織工程技術(shù)的迅速發(fā)展使現(xiàn)代醫(yī)學(xué)走出了組織、器官移植的范疇,進(jìn)入了組織、器官再造的新時(shí)代。骨缺損是骨科臨床上常見的疾病,骨缺損的修復(fù)也是臨床治療的難題之一。利用骨組織工程學(xué)技術(shù)制造仿生性骨膜,為解