二肽基肽4激活ERK1-2-NF--KB信號通路誘導(dǎo)人主動脈血管平滑肌細胞鈣化的研究.pdf

1、目的：探討可溶性二肽基肽4(soluble Dipep-tidyl peptidase4，sDPP4)促進人主動脈平滑肌細胞(Human aortic smooth muscle cells，HASMCs)鈣化的機制。
　　方法：在這項研究中，我們通過茜素紅及Von kossa染色探索了DPP-4對人血管平滑肌細胞(HVSMC)的鈣化影響。隨后，將人主動脈血管平滑肌細胞隨機分為對照組（正常培養(yǎng)），陽性對照組（β-甘油磷酸），低濃度

2、干預(yù)組(25ng/ml，DPP4)，高濃度干預(yù)組（200ng/ml，DPP4），高濃度+陽性對照組（DPP4+β-甘油磷酸），檢測各組細胞鈣化蛋白表達，最后再隨機分為對照組（正常培養(yǎng)），干預(yù)組（200ng/ml，DPP4），JNK抑制劑組(SP600125)、P38抑制劑組(SB203580)、ERK1/2抑制劑組(PD98059)和NF-KB抑制劑組(BAY11-7082)后，Western-blot法檢測各組細胞OPG，OPN，BM

3、P2，RUNX2蛋白表達水平;最后通過檢測ERK1/2和NF-KB磷酸化時間，得出相關(guān)通路的關(guān)系。
　　結(jié)果：茜素紅染色及及Von kossa染色結(jié)果顯示，與正常對照組相比，DPP4干預(yù)組鈣化結(jié)節(jié)明顯增多，且與鈣化組相當(dāng);且DPP4組OPG，OPN，RUNX2，BMP2蛋白表達水平成濃度，時間依賴性，DPP4干預(yù)下在15Min，500ng/ml時，P-ERK1/2表達明顯增高(P＜0.05);抑制劑組與DPP4組與相比，抑制劑組O

4、PG，OPN，RUNX2，BMP2表達均明顯降低(P＜0.05)。sDPP4組較對照組鈣化結(jié)節(jié)明顯增多;ERK1/2抑制劑組(PD98059)和NF-KB抑制劑組(BAY11-7082)較陽性對照組的OPG(38.41％，18.41％)，OPN(41.81％，61.58％)，RUNX2(44.21％，59.4％)，BMP2(48.3％，52.19％)蛋白表達水平明顯降低;400ng/ml sDPP4干預(yù)15min，P-ERK1/2表達明

5、顯增高(548.28％，372.55％);400ng/mlsDPP4干預(yù)60min，P-NF-κB表達明顯增高(431.83％，207.63％);sDPP4處理60min時，sDPP4+ERK1/2組P-NF-κB明顯降低(45.45％)，且N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine，NAC)組P-ERK1/2(0.03％)和P-NF-KB(48.15％)均下降。
　　結(jié)論：DPP4促進人VSMC鈣化的鈣化，其可能的