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文檔簡介
1、目的:研究棕櫚酸是否通過神經(jīng)酰胺途徑抑制肝星狀細胞增殖,揭示棕櫚酸抗肝星狀細胞增殖機制。
方法:體外培養(yǎng)HSC-T6細胞,應(yīng)用不同濃度的棕櫚酸溶液(0 uM、5uM、12.5 uM、25 uM、50 uM、100 uM、200 uM、400 uM)分別培養(yǎng)HSC-T6細胞24h和48h,采用CCK8法檢測HSC-T6細胞的增殖活力。篩選出抑制HSC-T6細胞增殖的最佳棕櫚酸溶液濃度(100 uM),進入下一步實驗。實驗分為對照
2、組、棕櫚酸組和棕櫚酸+伏馬菌素B1(FB1)組。應(yīng)用CCK8法檢測各組HSC-T6細胞的增殖活力。高效液相色譜法(HPLC)檢測HSC-T6細胞內(nèi)神經(jīng)酰胺含量。RT-PCR檢測各組HSC-T6細胞a-SMA mRNA表達水平。
結(jié)果:
1.棕櫚酸抑制HSC-T6增殖的作用具有濃度依賴性和時間依賴性。FB1能逆轉(zhuǎn)棕櫚酸對HSC-T6細胞增殖的抑制作用。
2.棕櫚酸組HSC-T6細胞的a-SMA mRNA表達水
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