內(nèi)皮細(xì)胞來源外泌體對(duì)缺血再灌注損傷后神經(jīng)保護(hù)作用的研究.pdf

1、分類號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：406521214090南昌大學(xué)碩士學(xué)位研究生學(xué)位論文內(nèi)皮細(xì)胞來源外泌體對(duì)缺血再灌注損傷內(nèi)皮細(xì)胞來源外泌體對(duì)缺血再灌注損傷后神經(jīng)保護(hù)作用的研究神經(jīng)保護(hù)作用的研究TheresearchofEndothelialcellderivedexosomeinneuroprotectionafterischemiareperfusioninjury柴毅培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：祝新根教授

2、主任醫(yī)師唐尤佳教授主任醫(yī)師申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)碩士學(xué)科專業(yè)名稱：外科學(xué)（神外）論文答辯日期：2017年6月答辯委員會(huì)主席：錢鎖開評(píng)閱人：李美華萬(wàn)登峰2017年5月中文摘要II中文摘要中文摘要目的目的在腦缺血的治療中，遠(yuǎn)程缺血后處理（Remoteischemiapostconditioning，RIP）能減少缺血再灌注（ischemiareperfusion，IR）損傷，然而，其機(jī)制未明。在本研究中，我們推測(cè)RIP對(duì)腦IR損傷的神經(jīng)保

3、護(hù)作用是由內(nèi)皮細(xì)胞釋放的外泌體所介導(dǎo)的，探討外泌體對(duì)人SHSY5Y神經(jīng)細(xì)胞IR損傷后的影響。方法方法1.第一步建立大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型、遠(yuǎn)程缺血后處理模型，采用TTC染色、HE染色、免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)大鼠大腦組織，評(píng)估損傷程度。2.第二步建立人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞（humanumbilicalveinendothelialcells，HUVECs）缺氧再灌注損傷模型（HUVECIR）及人SHSY5Y神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞缺氧再灌注模型

4、（SHSY5YIR），流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況，確定缺氧再灌注（IR）時(shí)間；分別提取動(dòng)物血清及HUVECs培養(yǎng)上清液中的外泌體(Exosome)，電鏡鑒定外泌體形態(tài)，粒徑分析外泌體數(shù)量；采用免疫組化染色檢測(cè)各組大鼠腦海馬組織中外泌體標(biāo)記蛋白CD63HSP70TSG101的表達(dá)量變化；Westernblot與流式細(xì)胞儀檢測(cè)血清中Exosome特異性蛋白CD63、HSP70和TSG101。3.第三步研究HUVEC來源外泌體對(duì)IR損傷后的S

5、HSY5Y細(xì)胞增殖、凋亡、細(xì)胞周期、遷移及侵襲能力的影響，同時(shí)，檢測(cè)凋亡相關(guān)分子Caspase3、Bax和Bcl2的表達(dá)。結(jié)果結(jié)果1、成功建立大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型、遠(yuǎn)程缺血后處理模型；并檢測(cè)再灌注24h后大鼠大腦梗死程度：a.TTC染色結(jié)果提示缺血后處理（RIP）組大鼠大腦缺血梗死體積明顯較手術(shù)（Model）組減少，假手術(shù)組（Sham）無梗死；b.H&E染色結(jié)果顯示假手術(shù)組大腦海馬解剖結(jié)構(gòu)完整，飽滿，無明顯凋亡；RIP組細(xì)胞