嚴(yán)重發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(SFTSV)與宿主先天免疫相互作用的初步研究.pdf

1、目的:嚴(yán)重發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(Severe fever with thrombocytopeniasyndrome virus，SFTSV)于2009年首次在國(guó)內(nèi)報(bào)道，它能夠引起發(fā)熱，血小板減少以及胃腸道癥狀。SFTSV經(jīng)蜱蟲叮咬傳播，主要發(fā)生在鄉(xiāng)村地區(qū)，早期致死率高達(dá)10％-30％。目前還沒有針對(duì)SFTSV的特異性抗病毒藥物，同時(shí)，關(guān)于SFTSV致病機(jī)制的研究報(bào)道還較少，并有待進(jìn)一步探討。
　　材料和方法:首先用含有SF

2、TSV的病人全血感染Vero細(xì)胞，利用Vero細(xì)胞獲取后續(xù)試驗(yàn)所需要的病毒，利用SFTSV定量試劑盒測(cè)定病毒的載量;讓SFTSV感染Hela,Huh7.0，Huh7.5.1三種細(xì)胞，用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Realtime PCR)檢測(cè)IFNα、IFNβ及下游干擾素刺激基因(interferon stimulated gene，ISG)的表達(dá)，觀察SFTSV對(duì)宿主固有免疫的影響;利用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot，WB)檢測(cè)

3、SFTSV以及非結(jié)構(gòu)蛋白(non-structural protein,NS)對(duì)p-STAT1的影響;利用雙熒光報(bào)告基因法檢測(cè)干擾素刺激反應(yīng)原件(Interferon stimulated response element，ISRE)的活性，研究SFTSV以及其編碼的NS蛋白對(duì)外源性Ⅰ型IFN信號(hào)通路的影響，為闡明SFTSV致病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
　　結(jié)果:SFTSV能夠成功感染Vero，Hela，Huh7.0及Huh7.5.1四種細(xì)

4、胞;SFTSV在Hela細(xì)胞內(nèi)能夠激活宿主固有免疫，IFNα/β水平呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，RIG-Ⅰ，TLR-3水平也相應(yīng)升高，而在Huh7.0，Huh7.5.1細(xì)胞內(nèi)IFNα/β水平并沒有升高;SFTSV能夠通過NS蛋白抑制外源性Ⅰ型IFN信號(hào)通路:抑制p-STAT1的水平，抑制ISRE的活性;抑制ISGs的表達(dá)。
　　結(jié)論:研究結(jié)果表明SFTSV可能通過TLR-3信號(hào)途徑激活宿主固有免疫;SFTSV編碼的NS蛋白可能是SFTSV逃逸宿