2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、背景:
  低血糖是糖尿病患者強化血糖控制的常見并發(fā)癥。低血糖最容易導致腦損傷。“葡萄糖再灌注性腦損傷”概念的提出,使得人們對低血糖性腦損傷發(fā)病機制的認識更加復雜,也引發(fā)了對傳統臨床低血糖救治的再思考。研究低血糖發(fā)作及恢復過程中與腦損傷有關的病理機制,有可能為臨床低血糖救治過程中提供腦保護治療的靶標和思路。
  目的:
  本研究旨在采用同位素相對標記與絕對定量技術(Isobaric tag forrelative a

2、nd absolute quantitation, ITRAQ)連同多維液相色譜-串聯質譜聯用技術(LC-MS/MS)尋找低血糖大鼠與正常大鼠腦組織內的差異表達蛋白,對其進行表達量的驗證及相關生物學功能探討,初步闡明低血糖性腦損傷發(fā)病的相關分子機制,為低血糖性腦損傷的治療提供理論依據。
  方法:
  注射胰島素建立低血糖大鼠腦損傷模型,提取腦組織蛋白,酶解后用iTRAQ化學標簽標記,進行多維液相色譜分離—串聯質譜鑒定,篩選

3、潛在的可能與低血糖性腦損傷相關的差異蛋白。選取差異表達明顯且生物學功能相關者在重新建立的動物模型上進行mRNA和蛋白水平的表達量驗證。最后在模擬低血糖的體外無糖培養(yǎng)星形膠質細胞模型上利用RNA干擾技術進行相關生物學功能的初步研究。
  結果:
  通過比較低血糖大鼠與假造模大鼠腦組織的蛋白表達,以相對表達量≥1.5或≤0.67為標準,共篩選到147種差異表達蛋白。采用實時熒光定量聚合酶鏈反應和免疫印跡法在復制的動物模型上證實

4、AQP4,NDRG1,DJ-1和Clusterin四個蛋白的表達量與在蛋白組學中發(fā)現的表達量變化趨勢一致。在模擬的體外星形膠質細胞缺糖模型上進一步驗證了缺糖上調AQP4和DJ-1兩個蛋白的表達量。沉默DJ-1蛋白后,星形膠質細胞在無糖培養(yǎng)時死亡率明顯增加。將星形膠質細胞進行無糖培養(yǎng),觀察到AMPK通路被激活,自噬被啟動,但自噬通量受損。工具藥抑制自噬后無糖培養(yǎng)致星形膠質細胞死亡明顯增加。與正常表達D J-1的細胞比較,沉默DJ-1表達的

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