海藻酸鈉殼聚糖支架復(fù)合成骨細(xì)胞特異性多肽修復(fù)兔顱骨缺損.pdf

1、成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽是以人牙齦成纖維細(xì)胞為陰性吸附細(xì)胞，人顱骨成骨細(xì)胞為陽(yáng)性靶細(xì)胞，對(duì)噬菌體展示十二肽庫(kù)進(jìn)行全細(xì)胞差減篩選，獲得的與人成骨細(xì)胞有高度親和性的多肽分子。其氨基酸序列為VLAVPWSEPGYL（纈氨酸-亮氨酸-丙氨酸-纈氨酸-脯氨酸-色氨酸-絲氨酸-谷氨酸-脯氨酸-甘氨酸-絡(luò)氨酸-亮氨酸）。本實(shí)驗(yàn)依據(jù)組織工程學(xué)的原理，采用殼聚糖、海藻酸鈉為支架，成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽為信號(hào)因子，將二者復(fù)合植入兔顱骨極限骨缺損模型中，以評(píng)價(jià)

2、該特異性多肽的促成骨效應(yīng)。為臨床上解決顱頜面部骨缺損及口腔種植中普遍存在的骨質(zhì)、骨量不足問(wèn)題提供新的研究思路和治療方法。具體內(nèi)容如下：
　　第一部分：海藻酸鈉/殼聚糖/多肽復(fù)合凝膠的制備
　　在無(wú)菌條件下將海藻酸鈉/多肽混懸液與殼聚糖溶液混合，維持二者為非凝膠化的溶液狀態(tài)，并通過(guò)攪拌反應(yīng)使得多肽均勻分布于混合液中，調(diào)節(jié)多肽到目的終濃度160μg/ml，在一定溫度條件下制備成海藻酸鈉/殼聚糖/多肽復(fù)合凝膠。同時(shí)制備不加載成骨細(xì)

3、胞特異性識(shí)別多肽的復(fù)合凝膠，在實(shí)驗(yàn)中用作對(duì)照組。
　　第二部分：制備兔顱骨極限骨缺損動(dòng)物模型
　　選取健康新西蘭兔12只，制備兔顱骨雙側(cè)15 mm直徑圓形極限骨缺損。實(shí)驗(yàn)組缺損處植入海藻酸鈉/殼聚糖/多肽水凝膠，對(duì)照組植入海藻酸鈉/殼聚糖復(fù)合水凝膠，空白組不植入任何載體及藥物，隨機(jī)分組。術(shù)后8周活體行CBCT掃描、高頻鉬靶X線掃描、HE染色檢測(cè)成骨效果。
　　結(jié)果表明：影像學(xué)及組織形態(tài)學(xué)結(jié)果可見(jiàn)，實(shí)驗(yàn)組缺損區(qū)成骨量明顯