研究IL-27在EBI-induced gene-(EBI3)基因敲除鼠中的免疫抑制作用.pdf

1、目的:利用EBI-induced gene3(EBI3)-deficient mice,通過建立延遲性高敏反應來研究IL-27/EBI3信號的抗炎免疫抑制活性。
　　 方法:使用甲基化胎牛血清(mBSA)和完全弗氏佐劑(CFA)皮下(S.C)免疫野生型和基因敲除鼠尾根部。七天后激發(fā)小鼠,24小時后,用外徑千分尺測量小鼠左、右側足墊,并取足墊分析足墊炎癥細胞浸潤情況。培養(yǎng)激發(fā)后野生型和基因敲除鼠的腹股溝淋巴細胞,檢測細胞增殖,細胞

2、因子IFN-γ和IL-17產(chǎn)生量。從混合淋巴細胞中使用免疫磁珠法正篩選分離CD4+T細胞(>90％CD4+T cells)并混合于不同濃度的mBSA和輻射后脾臟細胞培養(yǎng)72小時,后檢測細胞增殖和細胞因子IFN-γ,IL-17,IL-10和IL-2產(chǎn)生。將陰性純化CD4+T細胞(>90％CD4+T cells)靜脈注射野生型小鼠體內(nèi),21小時后使用mBSA和PBS再次分別激發(fā)小鼠,分別測量小鼠足墊腫脹程度。
　　 結果:1.EBI

3、-3敲除鼠的足墊腫脹程度比野生型要高,表明EBI-3敲除鼠發(fā)生更加嚴重的超敏反應。2.小鼠的足墊免疫組化病理結果表明EBI-3敲除鼠比野生型小鼠有更多單核炎癥細胞的浸潤。3.EBI-3敲除鼠中混合淋巴細胞的增值更嚴重,并且有顯著性差異。EBI-3敲除鼠混合淋巴細胞產(chǎn)生減少的IFN-γ,但沒有顯著性差異,但是IL-17的水平明顯高于野生型小鼠。4.我們發(fā)現(xiàn)純化的mBSA特異性CD4+T細胞的增值反應EBI-3敲除鼠比野生型小鼠明顯,IFN