漢防己堿的藥代動力學(xué)和抗腫瘤特性研究.pdf

1、目的：研究家兔和大鼠體內(nèi)漢防己堿(Tet)的代謝動力學(xué)特征以及Tet的抗腫瘤特性，以期評價Tet用于治療腫瘤性疾病的合理性。
　　 方法：采用RP-HPLC法，以靜脈及灌胃給藥的方式給予家兔及SD大鼠一定量的Tet，收集并測定血漿、尿液和糞便中Tet及其代謝物含量；用DAS軟件計算藥代動力學(xué)參數(shù)。以形態(tài)學(xué)、MTT法、流式細胞術(shù)、Western-blot等方法和技術(shù)研究Tet單用或合用其他抗腫瘤藥物時，對肝癌Hep3b、白血病K5

2、62、人成骨樣肉瘤MG63和卵巢癌SKOV3非耐藥和耐藥細胞的作用。
　　 結(jié)果：
　　 1.Tet經(jīng)靜脈或灌胃給予家兔后，其體內(nèi)過程均符合二室模型；
　　 靜脈注射(5 mg/kg體重)后的血藥峰濃度(Cmax)、藥時曲線下面積(AUC0→∞)、清除率(Cl0→∞)、表觀分布容積(Vd)和消除半衰期(t1/2β)分別為388.81±160.04 ng/mL、59861.149±26962.196μg/L*min

3、、0.503±0.173 L/min/kg、179±76.185 L/kg和283.808±162.937 min。
　　 灌胃(10 mg/kg體重)后的血藥峰濃度(Cmax)、藥時曲線下面積(AUC0→∞)、清除率(Cl0→∞)、表觀分布容積(Vd)和消除半衰期(t1/2β)分別為92.448±23.795 ng/mL、18986.217±7462.308μg/L*min、0.805±0.267 L/min/kg、110.2

4、84±94.176 L/kg和732.919±847.32 min。
　　 2.家兔連續(xù)三次靜脈注射Tet后120 h內(nèi)，經(jīng)尿排泄總量約占給藥總量的23.4％，其中原型藥約占4.05％。尿液中代謝物主要有3種形式。經(jīng)糞排泄總量約占總給藥量23.1％，其中原型藥約占7.81％。糞便中代謝物也有3種形式。大鼠經(jīng)單次靜脈注射Tet后70 h內(nèi)，經(jīng)尿排泄總量約占給藥量的65.1％，其中原形藥約占14.2％。尿液中排泄物主要有2種形式。經(jīng)

5、糞便排泄總量占所給藥物量的24.1％，其中原形藥約占7.0％；代謝物有3種形式。
　　 3.建立了Hep3b/5-Fu、K562/ADM、MG63/cDDP和SKOV3/cDDP耐藥細胞模型，發(fā)現(xiàn)耐藥Hep3b/5-Fu和K562/ADM細胞基礎(chǔ)量P-gp和MRP1蛋白表達低于非耐藥株。Tet(0.33-1.0μg/mL)對耐藥蛋白表達呈雙向調(diào)節(jié)作用，但不同細胞所需調(diào)節(jié)濃度不同：0.33μg/mL上調(diào)Hep3b、Hep3b/5-

6、Fu、K562和K562/ADM細胞P-gp表達，也上調(diào)K562和K562/ADM細胞MRP1表達；0.5μg/mL下調(diào)K562和K562/ADM細胞MRP1表達，但1.0μg/mL上調(diào)Hep3b/5-Fu細胞MRP1表達。Hep3b和K562非耐藥株和耐藥株的LRP基礎(chǔ)表達無明顯差異，Tet對LRP表達幾無影響。
　　 4.研究了Tet對兩類腫瘤細胞生長曲線、細胞周期和細胞存活率的影響，以及對ADM、5-Fu和cDDP抑制兩類

7、腫瘤細胞IC50的影響。發(fā)現(xiàn)0.33μg/mLTet加快進入指數(shù)生長期的腫瘤細胞凋亡，而對細胞周期無明顯影響；0.33-1.0μg/mLTet單用對上述四種非耐藥腫瘤細胞生長的抑制作用非常弱，對耐藥細胞幾無影響，甚至提高存活率。Tet對ADM、5-Fu、cDDP抑制腫瘤細胞的IC50影響呈雙向性：0.33μg/mL明顯提升ADM和cDDP對K562，cDDP對Hep3b/5-Fu及MG63/cDDP，以及cDDP和5-Fu對SKOV3細

8、胞抑制的IC50；0.5μg/mL明顯降低cDDP對K562、Hep3b/5-Fu和MG63/cDDP細胞抑制的IC50；1.0μg/mL明顯降低cDDP對K562、Hep3b/5-Fu、SKOV3和MG63/cDDP，以及5-Fu對Hep3b/5-Fu、SKOV3細胞抑制的IC50。
　　 結(jié)論：
　　 1.Tet靜脈和灌胃給予家兔后，在家兔體內(nèi)的過程均符合二室模型；灌胃給藥后吸收少，排泄慢。
　　 2.Tet

9、在家兔和大鼠體內(nèi)的代謝慢，代謝產(chǎn)物至少有三種；代謝消除是漢防己堿在體內(nèi)的主要消除方式。與大鼠相比，Tet在家兔體內(nèi)的代謝及排泄較慢；主要經(jīng)過腎臟和膽汁排泄。
　　 3.與P-gp和MRP1相比，Hep3b/5-Fu和K562/ADM細胞耐藥性與LRP蛋白表達無明顯關(guān)系。
　　 4.采用在家兔血液中能夠達到的安全Tet濃度單用對腫瘤細胞的抑制作用很弱，與其他抗腫瘤藥物合用時對非耐藥和耐藥腫瘤株的呈雙向作用：低濃度傾向于誘導(dǎo)