槲皮素對LPS誘導(dǎo)流產(chǎn)小鼠子宮MCP-1、巨噬細(xì)胞及TNF-a的影響.pdf

1、目的:
　　 通過研究槲皮素對細(xì)菌脂多糖(LPS)誘導(dǎo)流產(chǎn)小鼠子宮局部巨噬細(xì)胞的變化以及CD14、TNF-a、MCP-1表達(dá)的影響，從而在細(xì)胞與分子水平深入探討槲皮素的保胎作用機(jī)理，為研究新型免疫抑制劑提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。
　　 方法:
　　 昆明種小鼠隨機(jī)分為對照組（A組）、LPS流產(chǎn)模型組（B組）、槲皮素處理組（C組）、槲皮素和LPS雙處理組（D組），每組每時間點(diǎn)5只孕鼠。A組、B組小鼠從孕2天開始至孕7

2、天止連續(xù)灌胃PBS(0.4ml)，在孕7天時于末次灌胃后A組小鼠尾靜脈注射PBS(0.2ml)，B組小鼠尾靜脈注射LPS(0.2ml)。C組、D組小鼠從孕2天開始至孕7天止連續(xù)灌服槲皮素(0.4ml)，在孕7天時于末次灌胃后C組小鼠尾靜脈注射PBS(0.2ml)，D組小鼠尾靜脈注射LPS(0.2ml)。所有實驗組別的孕鼠在末次注射后的1h、3h、6h、12h、24h脫頸椎處死，剖開腹腔，觀察子宮和胚胎狀態(tài)，取子宮通過免疫組化方法檢測CD

3、14+巨噬細(xì)胞的數(shù)量與分布以及CD14表達(dá)的變化，采用ELISA方法檢測TNF-a和MCP-1含量的變化。
　　 結(jié)果:
　　 (1)B組和D組小鼠流產(chǎn)率和胚胎吸收率均極顯著高于A組．但D組小鼠流產(chǎn)率和胚胎吸收率均極顯著低于B組，其中LPS模型組流產(chǎn)率達(dá)到100％（P＜0.01），槲皮素和LPS雙處理組流產(chǎn)率降至40％（P＜0.01）。
　　 (2)與A組相比，B組和D組小鼠末次注射LPSlh后，子宮內(nèi)MCP-1

4、和TNF-a的含量極顯著升高（P＜0.01），CD14+巨噬細(xì)胞的數(shù)量極顯著增加（P＜0.01），CD14表達(dá)上調(diào)(P＜0.01);與B組相比，D組小鼠末次注射LPSlh后，子宮內(nèi)MCP-1和TNF-a的含量極顯著降低（P＜0.01），CD14+巨噬細(xì)胞的數(shù)量極顯著減少(P＜0.01)，CD14表達(dá)下調(diào)（P＜0.01）。
　　 (3)B組小鼠注射LPS1h后子宮內(nèi)MCP-1和TNF-a的含量升高，12h、24h仍在上升。D組小鼠

5、注射LPS6h后子宮內(nèi)MCP-1和TNF-a的含量下降，12h、24h接近A組表達(dá)水平，隨著時間延長呈下降趨勢。
　　 結(jié)論:
　　 (1)隨著LPS作用時間延長，流產(chǎn)小鼠子宮內(nèi)MCP-1的含量升高，并伴隨CD14+巨噬細(xì)胞數(shù)量增多、CD14陽性表達(dá)增強(qiáng)以及TNF-a的含量升高。
　　 (2)子宮炎癥中，巨噬細(xì)胞從系膜區(qū)和外膜向內(nèi)膜遷移，可能與子宮內(nèi)MCP-1的高水平表達(dá)有關(guān)，而槲皮素通過抑制MCP-1的牛成減弱