人血漿中二苯乙烯類化合物HPLC-MS-MS檢測方法的基質(zhì)效應(yīng)及其解決方案.pdf

1、目的：高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS/MS)，以其靈敏度高、定量準(zhǔn)的優(yōu)勢，一直作為生物樣品痕量分析的主要手段，特別是上世紀(jì)90年代，大氣壓離子化(atmospheric pressure ionization，API)等接口的發(fā)明，使之在定量檢測這一領(lǐng)域應(yīng)用更加廣泛。特別是在生物檢測等方面但是生物樣品在進(jìn)行檢測的時(shí)候，經(jīng)常會出現(xiàn)離子信號抑制或者提高的現(xiàn)象，這種顯現(xiàn)被稱為基質(zhì)效應(yīng)，是因?yàn)樵谏V分離時(shí)共洗脫的內(nèi)源性物質(zhì)影響了離子

2、化信號的準(zhǔn)確性。
　　 二苯乙烯類化合物就有較強(qiáng)的藥理活性及研究價(jià)值。在本實(shí)驗(yàn)以八種二苯乙烯類化合物為研究對象，對基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行了定量的測定，檢測了不同萃取劑:甲基叔丁基醚、乙醚、乙酸乙酯;不同酸堿條件:pH=4.01、5.00、6.86、8.00、9.18時(shí)的基質(zhì)效應(yīng)的大小。從而找出一種最優(yōu)的萃取條件。
　　 方法：
　　 本實(shí)驗(yàn)采用液-液萃取的方法，使用甲基叔丁基醚、乙醚、乙酸乙酯三種常用的萃取劑，分別在pH=

3、4.01、5.0、6.86、8.00、9.18五種不同的pH條件下進(jìn)行萃取八種二苯乙烯類化合物。
　　 采用HPLC-MS/MS方法進(jìn)行檢測，液相色譜系統(tǒng)為Agilent1200型高效液相色譜系統(tǒng)，MS/MS系統(tǒng)為AB SCIEX QTRAP5500型三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜儀，數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)為Analyst1.5.1軟件。色譜柱為Ultra C18柱(粒徑5.0μm，150mm×2.1 mm I.D)，預(yù)柱為HYPERSIL GOLD

4、（粒徑3μm，10×2.1mmI.D），流動相成分為乙腈、水、甲酸銨。
　　 基質(zhì)效應(yīng)定量采用提取后添加的方法。
　　 使用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，使用Excel與Original8.0進(jìn)行繪圖。
　　 結(jié)果：
　　 根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)條件，八種物質(zhì)在三種不同的萃取劑的條件下，在堿性條件萃取的基質(zhì)效應(yīng)較小(-15＜MF＜15)，在pH=8.00時(shí)，基質(zhì)效應(yīng)最小。但是在乙酸乙酯為萃取劑情況下，白藜蘆醇三甲醚與三乙