苯乙醇苷類化合物及其混合物組分群的質(zhì)譜分析方法以及LC-MS-NMR相關(guān)譜分析方法研究.pdf

1、本論文主要開展了苯乙醇苷等類天然產(chǎn)物的質(zhì)譜分析方法及其混合物體系的LC-MS與NMR相關(guān)譜分析方法研究，實(shí)現(xiàn)了復(fù)雜混合物不完全分離的同步結(jié)構(gòu)鑒定。首先，在負(fù)離子模式下對(duì)氫醌苷和苯乙醇苷類化合物進(jìn)行了系統(tǒng)的ESI-MSn譜分析研究，掌握了這兩類化合物結(jié)構(gòu)特征與質(zhì)譜裂解行為之間的相關(guān)性，歸納及總結(jié)它們的ESI-MSn裂解特征，建立了簡便、快速鑒別氫醌苷和苯乙醇苷類化合物的質(zhì)譜分析方法。在前期建立的LC-MS與1HNMR的平行動(dòng)態(tài)譜(NMR/

2、LC-MSPDS)和正交相關(guān)譜(NMR/LC-MSCHS)方法的基礎(chǔ)上，成功地將這種新型譜學(xué)分析方法應(yīng)用于小蠟樹及連翹提取物，拓展了NMR/LC-MSPDS與NMR/LC-MSCHS譜學(xué)分析方法的應(yīng)用范圍；同時(shí)結(jié)合HPLC-MSn，2DNMR譜等方法，實(shí)現(xiàn)了復(fù)雜混合物體系組分群無需完全分離，高效、多容量的結(jié)構(gòu)鑒定。運(yùn)用上述方法共分析鑒定兩份提取物中19個(gè)成分的結(jié)構(gòu)，其中連翹提取物中有3個(gè)成分為新化合物，小蠟樹提取中有4個(gè)成分為該屬植物內(nèi)

3、首次發(fā)現(xiàn)。
　　 本論文的研究內(nèi)容主要包括以下四個(gè)部分：
　　 1.氫醌苷類化合物的質(zhì)譜裂解規(guī)律研究：
　　 采用(-)ESI-MSn方法，系統(tǒng)地研究了一系列氫醌苷類化合物的質(zhì)譜裂解規(guī)律，發(fā)現(xiàn)其結(jié)構(gòu)特征與質(zhì)譜行為的相關(guān)性。其中氫醌單糖苷及氫醌1,4-二-O-糖苷主要發(fā)生糖苷鍵的均裂與異裂反應(yīng)，產(chǎn)生自由基苷元離子([Y0-H]-·)與苷元離子(Y0-)。研究還發(fā)現(xiàn)苯環(huán)上甲氧基的取代數(shù)目及其位置對(duì)[Y0-H]-·/Y

4、O-離子強(qiáng)度比值產(chǎn)生顯著的影響。此外，通過細(xì)致的考察及優(yōu)化碰撞能量，獲得[Y0-H]-·與Y0-離子相對(duì)強(qiáng)度的特異性差異，成功用于糖基化位置不同的氫醌單糖苷同分異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)鑒別。此外，氫醌O-雙糖苷類化合物主要發(fā)生糖鏈部分的交叉環(huán)切除反應(yīng)，產(chǎn)生與糖鏈結(jié)構(gòu)相關(guān)的系列特征離子。通過氫醌苷類化合物裂解規(guī)律的研究，建立了快速分析這類化合物的質(zhì)譜分析方法，并為混合物中同類成分的結(jié)構(gòu)鑒定提供了可靠的分析依據(jù)。
　　 2.苯乙醇苷類化合物的質(zhì)

5、譜裂解規(guī)律研究：
　　 采用(-)ESI-MSn方法，對(duì)不同類型的苯乙醇苷類化合物的裂解行為進(jìn)行了細(xì)致地研究，其中包括苯乙醇單糖苷、芹糖苯乙醇苷及咖啡?；揭掖架盏阮惢衔?，探討了各類化合物結(jié)構(gòu)特征與質(zhì)譜行為的相關(guān)性及其變化規(guī)律。研究發(fā)現(xiàn)苯乙醇單糖苷類化合物由于其糖基化的位置及苯環(huán)上C-3位取代基的不同而表現(xiàn)出不同的裂解行為；咖啡?；揭掖架疹惢衔铮瑒t產(chǎn)生一系列與咖啡?；嘘P(guān)的特征離子。通過ESI-MSn譜分析能夠有效地鑒定各

6、種類型的苯乙醇苷類化合物，并為指導(dǎo)混合物中同類成分的結(jié)構(gòu)鑒定提供了有力的分析依據(jù)。
　　 3.小蠟樹提取物組分群的NMR與LC-MS平行動(dòng)態(tài)譜和正交相關(guān)譜分析方法研究：
　　 將小蠟樹乙醇提取物作為研究對(duì)象，首次以凝膠柱色譜為主要分離手段，獲取含量呈連續(xù)動(dòng)態(tài)變化的系列混合物。對(duì)于系列流份分別進(jìn)行LC-MSn和1HNMR譜測定，并采用MATLAB軟件編寫的數(shù)據(jù)處理程序，對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行處理與分析，構(gòu)成NMR/LC-MSPDS

7、和NMR/LC-MSCHS譜。通過綜合分析，獲取多組分混合物中同一成分的質(zhì)荷比(m/z)和化學(xué)位移值(δ)等相關(guān)性信息，利用這些信息并結(jié)合HPLC_MSn、1H-1HCOSY、1D或2DNOESY譜等分析方法對(duì)這些系列流份中的氫醌苷類及苯乙醇苷類成分進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析研究。實(shí)現(xiàn)了小蠟樹提取物中12個(gè)成分不完全分離的同步結(jié)構(gòu)鑒定，其中包括3個(gè)氫醌苷類化合物，8個(gè)苯乙醇苷類化合物，以及一個(gè)香草酸苷類化合物，其中有4個(gè)成分為首次從本屬植物中發(fā)現(xiàn)。

8、
　　 4.連翹提取物組分群的NMR與LC-MS平行動(dòng)態(tài)譜和正交相關(guān)譜分析方法研究：
　　 以常用中藥連翹水提取物為研究對(duì)象，利用制備型高效液相色譜技術(shù)獲取含量呈連續(xù)動(dòng)態(tài)變化的系列混合物，并分別進(jìn)行LC-MSn和1HNMR譜測定。然后采用MATLAB軟件編寫的數(shù)據(jù)處理程序，構(gòu)成NMR/LC-MSPDS和NMR/LC-MSCHS譜，并結(jié)合HPLC-MSn及1H-1HCOSY，1D-TOCSY和2DNOESY等譜學(xué)方法對(duì)這些