rhTNK-tPA凍干粉針劑放大生產(chǎn)的凍干工藝研究.pdf

1、研究目的：
　　通過(guò)對(duì)注射用重組人TNK組織型纖溶酶原激活劑（Recombinant Human TNK Tissue-type Plasminogen Activator for Injection，簡(jiǎn)稱rhTNK-tPA）凍干粉針劑關(guān)鍵生產(chǎn)工序真空冷凍干燥工藝（以下簡(jiǎn)稱“凍干工藝”）的放大生產(chǎn)研究，建立符合2010版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（Good Manufacture Practice，簡(jiǎn)稱GMP），以及生物制品上市注冊(cè)

2、要求的生產(chǎn)工藝，并為同類(lèi)生物制品的凍干工藝放大提供示范和參考。
　　研究?jī)?nèi)容:
　　采用的材料是rhTNK-tPA原液，具體方法如下：
　　1)按照相關(guān)法規(guī)，根據(jù)原液濃度（蛋白質(zhì)含量）、西林瓶容積及合適的藥液凍干厚度來(lái)確定分裝量。
　　2)利用共晶點(diǎn)測(cè)試儀測(cè)試藥液的共晶點(diǎn)和共熔點(diǎn)，根據(jù)測(cè)試結(jié)果，在中試凍干曲線的基礎(chǔ)上調(diào)整生產(chǎn)凍干曲線；
　　3)確認(rèn)凍干機(jī)符合GMP要求并滿足工藝需要；
　　4)用調(diào)整的

3、凍干曲線進(jìn)行凍干工藝的放大研究，主要從設(shè)定溫度和真空度、預(yù)凍最低溫度和降溫速率、升華溫度和升華速率等方面進(jìn)行優(yōu)化，生產(chǎn)出符合rhTNK-tPA成品放行標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品。工藝確定后通過(guò)至少3批生產(chǎn)驗(yàn)證來(lái)確認(rèn)工藝的穩(wěn)定性和可控性。
　　研究結(jié)果:
　　1)制劑組分及分裝量：rhTNK-tPA為主藥，藥液分裝量約為3.2ml，蛋白質(zhì)濃度為5.33mg/ml，L-精氨酸和聚山梨酯80為凍干保護(hù)劑，磷酸為pH調(diào)節(jié)劑。
　　2)根據(jù)4批

4、次藥液共10次共晶點(diǎn)和共熔點(diǎn)的測(cè)定，確定藥液的共晶點(diǎn)或共晶區(qū)為-8℃～-12℃，固化的穩(wěn)定溫度約在-18～-24℃，共熔點(diǎn)為-4℃。
　　3)凍干工藝摸索：通過(guò)3批緩沖液試機(jī)、5批摸索優(yōu)化凍干試驗(yàn)，根據(jù)藥液分裝厚度延長(zhǎng)預(yù)凍時(shí)間和升華時(shí)間，不斷進(jìn)行凍干參數(shù)調(diào)整，基本確定凍干曲線。接著通過(guò)2批試生產(chǎn)，各階段制品溫度穩(wěn)定，凍干工藝相對(duì)穩(wěn)定。
　　4)凍干工藝驗(yàn)證：通過(guò)5批連續(xù)工藝驗(yàn)證，驗(yàn)證結(jié)果顯示凍干工藝基本穩(wěn)定。5批工藝驗(yàn)證的凍

5、干總用時(shí)為48～53h，其中預(yù)凍階段用時(shí)6～8h，升華干燥階段用時(shí)29～33.5h，解吸干燥階段用時(shí)9.5～12.5h。
　　5)工藝再驗(yàn)證：用經(jīng)工藝驗(yàn)證的凍干工藝生產(chǎn)國(guó)家藥監(jiān)局注冊(cè)和GMP現(xiàn)場(chǎng)檢查批共9批次，成品的所有檢測(cè)項(xiàng)目均符合注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)，表明在現(xiàn)有的生產(chǎn)環(huán)境和工藝條件下，能持續(xù)穩(wěn)定地生產(chǎn)出符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品。
　　6)成品批次放行檢定：rhTNK-tPA成品檢定項(xiàng)目主要包括理化（外觀、復(fù)溶時(shí)間、可見(jiàn)異物、裝量差異、不溶