南極磷蝦金屬結(jié)合肽的制備及其結(jié)合機(jī)理研究.pdf

1、近年來(lái),以海洋生物為原料研發(fā)的功能性食品越來(lái)越受到人們關(guān)注。南極磷蝦具有生物儲(chǔ)量大,蛋白質(zhì)含量豐富,氨基酸組成合理,適合人類食用等特點(diǎn),是一種新型的海洋食品原料。礦物元素缺乏是目前影響世界各國(guó)居民身體健康的重要隱患之一,主要?dú)w因于礦質(zhì)元素?cái)z入量不足和體內(nèi)吸收利用率低。前人研究表明,具有金屬離子結(jié)合活性的多肽可以有效提高金屬離子在腸道環(huán)境下的溶解性和穩(wěn)定性,增加金屬離子的吸收率。因此,以多肽為載體制備金屬-多肽可溶性復(fù)合物是改善人體礦質(zhì)元

2、素缺乏現(xiàn)象的有效手段。本研究以南極磷蝦的有效利用為出發(fā)點(diǎn),以磷蝦金屬結(jié)合肽的制備及其金屬離子結(jié)合能力探究為切入點(diǎn),旨在為人體礦物質(zhì)元素缺乏的改善和南極磷蝦的高值化利用提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。本論文的主要結(jié)論如下:
　　(1)以脫脂后的冷凍南極磷蝦(E. superba)為原料,分別采用三種蛋白酶制備了純度和安全性較高的南極磷蝦活性肽。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,南極磷蝦肽具有顯著的金屬離子(Zn2+、Fe2+、Zn2+)結(jié)合活性,可以做為礦物質(zhì)

3、離子的有效載體,改善人體礦質(zhì)元素缺乏現(xiàn)象。三種南極磷蝦肽中,胰蛋白酶水解肽的金屬離子結(jié)合能力最強(qiáng),這與其酸性氨基酸含量高及分子量組成相關(guān)。
　　(2)以酶解產(chǎn)物的蛋白含量和鈣結(jié)合能力為評(píng)價(jià)指標(biāo),在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)面分析優(yōu)化了胰蛋白酶水解制備金屬離子結(jié)合南極磷蝦肽的最佳工藝條件。結(jié)果表明,當(dāng)酶解時(shí)間為3h,液料比為11.3∶1,酶添加量為3％時(shí),酶解效果最好。此時(shí),酶解10g脫脂南極磷蝦粉,磷蝦肽總量為3.96g,每克蛋

4、白結(jié)合的可溶性鈣總量為8.86mmol。
　　(3)通過(guò)對(duì)南極磷蝦肽二級(jí)結(jié)構(gòu)和三維構(gòu)象的分析,探究了南極磷蝦肽與金屬離子的作用機(jī)理。結(jié)果表明,南極磷蝦肽在水溶液中具有柔軟的二級(jí)結(jié)構(gòu)和可變的三維構(gòu)像。南極磷蝦肽結(jié)合金屬離子的容量按照如下順序依次增加:Ca2+