食品加工環(huán)境接觸表面上活性及亞致死致病菌檢測技術(shù)研究.pdf

1、食品加工環(huán)境中食品接觸表面及環(huán)境表面致病菌的檢測是食品質(zhì)量安全監(jiān)測控制的重要一環(huán)，本課題采用濾紙覆蓋取樣檢測接觸表面致病菌，建立規(guī)范其方法流程，最后以此優(yōu)化后的方法檢測評(píng)估食品加工臺(tái)面上正常、熱、冷凍以及饑餓脅迫處理后的表面致病菌及其亞致死細(xì)胞數(shù)目。具體工作及結(jié)果結(jié)論如下：
　　評(píng)估了4℃和25℃條件下24 h內(nèi)金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、單核細(xì)胞增生李斯特菌在五種樣品處理液中的生長情況以及三種致病菌直接接種濾紙?jiān)诟鳂悠啡芤褐械南疵?/p>

2、釋放效果，最后評(píng)估六種溶液潤濕處理濾紙采樣接觸表面致病菌的檢測效果。結(jié)果表明：4℃條件下三種致病菌在各處理液中數(shù)目變化不大，低溫有利于樣品保存，25℃條件下三種菌在五種處理液中的生長情況各不相同，僅磷酸鹽緩沖液（PBS）可同時(shí)滿足三種菌的數(shù)量穩(wěn)定；三種致病菌在幾種樣品處理液中的洗脫釋放效果均較佳；添加0.1％蛋白胨和0.1%吐溫80的0.85%NaCl（0.85% NaCl+0.1% PW+0.1%Tween80）溶液潤濕處理濾紙的接觸

3、表面致病菌檢測效果最佳。由以上實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)條件下選用0.85% NaCl+0.1% PW+0.1%Tween80溶液事先潤濕無菌干燥濾紙后進(jìn)行覆蓋取樣，取樣后投入PBS液中處理并檢測。
　　本方法與常規(guī)棉簽拭子方法作比較以評(píng)估其檢測效能，結(jié)果表明，當(dāng)表面致病菌污染水平為108 CFU/100cm2時(shí)，濾紙覆蓋法金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、單增細(xì)胞增生李斯特菌的平均獲得率分別為5.84%±1.51%，10.60%±4.84%，1.76%

4、±0.60%，濾紙覆蓋與棉簽擦拭法采樣三種致病菌結(jié)果相差均不大，差異均不顯著；濾紙覆蓋法對實(shí)驗(yàn)條件下三種菌的檢測限分別為2.78、3.33、4.40 Log(CFU/100cm2)。濾紙覆蓋法操作程序簡單方便，結(jié)果穩(wěn)定，可減少操作差異帶來的結(jié)果誤差，同時(shí)提高大批量采樣臺(tái)面類的效率，故可應(yīng)用于食品加工場所操作臺(tái)面致病菌的采樣檢測，具有進(jìn)一步研究完善價(jià)值。
　　正常情況下接觸表面上三種致病菌的濾紙覆蓋采樣檢測結(jié)果表明其在采樣檢測過程均

5、受到不同程度的損傷，本實(shí)驗(yàn)菌株中，金黃色葡萄球菌在濾紙覆蓋法采樣檢測過程中的損傷程度最小，其次是沙門氏菌，單核細(xì)胞增生李斯特菌對此過程最敏感因而擦拭類方法對其在接觸表面上污染的檢測分析損失更大；濾紙覆蓋法采樣檢測方法對接觸表面上的熱脅迫亞致死菌的檢測效能并不低于正常情況，即方法對熱脅迫亞致死致病菌無顯著損傷作用；24 h饑餓脅迫或-18℃凍藏脅迫24 h并不會(huì)造成接觸表面這三種菌總活菌數(shù)目的大幅減少，而是使其進(jìn)入亞致死狀態(tài)；三種致病菌對