速凍食品中亞致死致病菌多重修復(fù)技術(shù)的研究.pdf

1、本文以速凍食品主要的致病菌為研究對(duì)象，研究了速凍食品在貯藏過(guò)程中的生長(zhǎng)變化，并以速凍水餃為基礎(chǔ)，探討了背景菌對(duì)亞致死金黃色葡萄球菌修復(fù)檢測(cè)的影響，研究了一種對(duì)亞致死沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌和單增李斯特菌同時(shí)修復(fù)到快速檢測(cè)水平的培養(yǎng)液，具體工作有:
　　測(cè)定致病菌的生長(zhǎng)曲線及最大耐鹽量，將培養(yǎng)至指數(shù)后期的致病菌速凍后，在-18℃凍藏。在凍藏的過(guò)程中，一定時(shí)間內(nèi)，用含有和不含氯化鈉的0.6％酵母粉胰蛋白胨大豆肉湯瓊脂培養(yǎng)基對(duì)細(xì)菌進(jìn)行檢

2、測(cè)，觀察其菌落變化。金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌和單增李斯特菌37℃振蕩培養(yǎng)至指數(shù)后期的時(shí)間分別為5、5和8h;最大耐鹽量分別為10％、6％和7％;沙門(mén)氏菌在凍藏的過(guò)程中更易得到亞致死細(xì)胞。
　　首先將冷凍亞致死金黃色葡萄球菌在酵母含量為0.6％的胰蛋白胨大豆肉湯和10％氯化鈉胰酪胨大豆肉湯中的生長(zhǎng)進(jìn)行對(duì)比，然后將冷凍亞致死的金黃色葡萄球菌接種至含有不同速凍水餃背景菌濃度的培養(yǎng)液中，24 h內(nèi)每?jī)蓚€(gè)小時(shí)測(cè)定一次菌落總數(shù)和金黃色葡萄球菌

3、的數(shù)量，用Gompertz模型對(duì)其生長(zhǎng)參數(shù)進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果表明:10％氯化鈉胰酪胨大豆肉湯對(duì)冷凍亞致死金黃色葡萄球菌的修復(fù)具有抑制作用;背景菌的存在對(duì)冷凍亞致死的金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)速率和遲滯期有影響:背景菌的濃度越高，金黃色葡萄球菌最終的數(shù)量就越少。
　　將金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌和單增李斯特菌在常用的增菌液中（緩沖蛋白胨水、營(yíng)養(yǎng)肉湯等）進(jìn)行共增菌培養(yǎng)，選定0.6％酵母粉胰蛋白胨大豆肉湯為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加亞碲酸鉀、氯化鋰和氯化鈉來(lái)

4、抑制沙門(mén)氏菌的生長(zhǎng)，通過(guò)響應(yīng)面分析法，確定其最佳添加參數(shù)為0.6 mg/L、2.49 g/L和0.6％。在此條件下單增李斯特菌、沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌濃度分別達(dá)到106、107、108 CFU/mL。
　　把培養(yǎng)至指數(shù)后期的金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌和單增李斯特菌分別進(jìn)行-40℃冷凍脅迫30 min和60℃加熱處理5 min，然后將原菌液、冷凍脅迫和熱脅迫菌液分別接種進(jìn)優(yōu)化過(guò)的胰蛋白胨大豆肉湯中，檢測(cè)優(yōu)化后的培養(yǎng)液對(duì)處理后的細(xì)菌的