脂肪酶的化學(xué)修飾及其在帕羅醇拆分中的應(yīng)用研究.pdf

1、脂肪酶(EC3.1.1.3)以其高選擇性、高穩(wěn)定性、反應(yīng)條件溫和,不需要輔酶等優(yōu)良特性成為一種重要的工業(yè)用酶,廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、化工、食品、飼料和能源等行業(yè)。帕羅醇是帕羅西汀的中間體,目前其拆分以化學(xué)法為主。但是近年來隨著人們對(duì)綠色化學(xué)品需求的增加,以酶作為催化劑來進(jìn)行手性拆分越來越引起人們的重視。因此,本課題基于非水相酶學(xué)的相關(guān)原理,利用脂肪酶對(duì)其拆分。
　　(1)從7種不同來源的脂肪酶中篩選得到的CRL的催化效率最高。乙腈作為反

2、應(yīng)介質(zhì)的效果最好。通過對(duì)影響酶催化拆分帕羅醇的操作條件進(jìn)行優(yōu)化,得到的最優(yōu)操作條件為:酶濃度10g/l,轉(zhuǎn)速100r/min,底物摩爾比5:1,反應(yīng)溫度35℃和反應(yīng)時(shí)間18h,在此條件下的底物轉(zhuǎn)化率為46.95％。
　　(2)分別應(yīng)用丁二酸酐和鄰苯二甲酸酐對(duì)CRL脂肪酶進(jìn)行了化學(xué)修飾,修飾后的酶的熱穩(wěn)定性比天然酶有明顯提高,修飾酶的酶活損失較小;耐有機(jī)溶劑性更強(qiáng);紫外吸收光譜說明CRL確實(shí)發(fā)生了化學(xué)修飾,且導(dǎo)致酶分子結(jié)構(gòu)發(fā)生一定的