分子擁擠條件下陽離子卟啉對(duì)G-四鏈體的識(shí)別和穩(wěn)定.pdf

1、G-四鏈體是一種由富G序列形成的特殊的核酸二級(jí)結(jié)構(gòu)。位于真核細(xì)胞內(nèi)線性染色體末端的端粒富G序列一旦形成G-四鏈體結(jié)構(gòu),將有效抑制端粒酶的活性,從而成為引人注目的癌癥治療的新靶點(diǎn)。
　　近年來,文獻(xiàn)報(bào)道了大量有關(guān)小分子配體與G-四鏈體作用的研究工作,但是絕大多數(shù)研究都集中在配體與單體G-四鏈體(只含一個(gè)四鏈體單元)的作用上,且這些研究多在稀溶液條件下進(jìn)行的。然而,端粒中的富G單鏈懸突有100~200nt,它可以折疊形成含有多個(gè)連續(xù)四

2、鏈體單元的多倍體G-四鏈體結(jié)構(gòu)。有關(guān)端粒多倍體G-四鏈體配體的研究也更具價(jià)值。據(jù)我們所知,能和多倍體G-四鏈體作用的小分子配體鮮有報(bào)道。另一方面,真實(shí)的活細(xì)胞中充滿了各種生物大分子,這種分子擁擠的條件會(huì)對(duì)G-四鏈體的結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性、小分子與G-四鏈體的作用產(chǎn)生極大的影響。人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一些配體在分子擁擠條件下對(duì)G-四鏈體的穩(wěn)定作用顯著降低甚至完全消失。所以,選擇在分子擁擠條件下進(jìn)行配體與G-四鏈體的研究更具有應(yīng)用意義。此外,除端粒外,人體內(nèi)

3、其他區(qū)域也存在著可形成G-四鏈體的富G序列,如致癌基因啟動(dòng)子、免疫球蛋白轉(zhuǎn)換區(qū)、胰島素調(diào)節(jié)區(qū)等。這些包埋于雙鏈DNA中的富G序列,也已經(jīng)被證實(shí)可以形成G-四鏈體,并與雙鏈形成相互競(jìng)爭,但關(guān)于這類研究的報(bào)道卻不多。
　　基于上述考慮,本論文的主要研究內(nèi)容及成果如下:
　　1)利用紫外-可見光譜、熒光光譜、圓二色譜等手段研究了陽離子卟啉化合物TMPipEOPP在分子擁擠條件下與單體G-四鏈體的作用,證實(shí)了利用TMPipEOPP可

4、以特異性地將單體G-四鏈體與單鏈、雙鏈、三鏈體DNA區(qū)分開。
　　2)研究了分子擁擠條件下TMPipEOPP與多倍體端粒G-四鏈體的作用,證實(shí)了TMPipEOPP同樣可以作為一種特異性識(shí)別和穩(wěn)定多倍體端粒G-四鏈體的配體,同時(shí)也首次證明了兩個(gè)相鄰G-四鏈體單元間的空間對(duì)配體與多倍體G-四鏈體間的相互作用具有重要影響。
　　3)在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究了TMPipEOPP對(duì)包埋于雙鏈DNA中的G-四鏈體識(shí)別與作用。結(jié)果表明,利用