導電纖維支架調(diào)控心肌細胞和肝細胞的研究.pdf

1、電紡纖維支架能夠很好地模擬細胞胞外基質(zhì)(ECM)的天然空間結(jié)構(gòu)，非常適合細胞的支撐生長，利于形成類組織體，但常規(guī)聚合物纖維支架缺乏導電性，難于滿足培養(yǎng)神經(jīng)細胞和心肌細胞等的要求。因此，本論文將多壁碳納米管(CNT)摻雜到高分子聚合物中，并使用高速轉(zhuǎn)動接收器制備了不同形貌和電導率的定向纖維支架。聚乙二醇-聚乳酸(PELA)和CNT以不同比例混合，制備了不同電導率的混紡和同軸紡纖維支架，并用于心肌細胞的研究;聚苯乙烯馬來酸酐(PMSA)和C

2、NT以不同比例混紡得到導電纖維支架，經(jīng)半乳糖修飾后，用于肝細胞的研究。
　　心肌細胞在混紡和同軸紡PELA/CNT導電纖維支架上生長良好，細胞狹長鋪張，與纖維支架取向一致，形成定向的心肌膜片。結(jié)果表明，從心肌細胞的活力、遷移和蛋白表達等方面比較，同軸紡纖維支架的綜合性能優(yōu)于混紡導電支架。培養(yǎng)5天后心肌細胞鋪展生長，但沒有形成大片區(qū)，且跳動頻率不同步，其中CNT含量為4-5％纖維支架上的心肌細胞優(yōu)于其他組，細胞鋪展、蛋白表達較為突出

3、。培養(yǎng)10天后心肌細胞鋪展成片，細胞更為狹長，跳動頻率一致，尤其是在CNT含量為4％的同軸紡支架上，心肌細胞鋪滿整個支架，且長寬比值達到為6.5，同步跳動頻率達到80次/min，體現(xiàn)出心肌細胞和導電纖維支架的電機械耦合良好，適于心肌膜片的研究。
　　肝細胞在PSMA/CNT導電纖維支架上粘附聚集成球，3天后在支架上恢復細胞極性，開始部分肝細胞功能，如白蛋白分泌和尿素合成;培養(yǎng)7天和15天后，與其他支架相比，在CNT含量為3％的支架

4、上肝細胞成球良好，約為100μm，保持肝功能良好且持續(xù)時間長。進一步研究了對甲苯磺丁脲、S-華法林、咪達唑侖、睪酮、對乙酰氨基酚等藥物在此肝細胞培養(yǎng)體系上的代謝清除率，結(jié)果表明與體內(nèi)代謝具有一定的相關(guān)性，尤其CNT含量為3％的支架上培養(yǎng)的肝細胞，其體內(nèi)-體外相關(guān)系數(shù)為0.663;同時在利福平、谷胱甘肽、酮康唑、丙磺舒等酶誘導劑或抑制劑作用下，研究CYP3A4和Ⅱ相酶的酶活性、睪酮和對乙酰氨基酚的代謝清除率，結(jié)果表明該肝細胞模型能夠較好地