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文檔簡介
1、本課題采用熱提-極性pH法從臺灣75-1大豆中提取大豆多糖,并以動態(tài)高壓微射流技術(shù)(dynamic high pressure microfluidization,DHPM)為手段對大豆可溶性多糖(soluble soybean polysaccharides,SSPS)進(jìn)行改性,研究DHPM對SSPS組分、結(jié)構(gòu)及功能特性的影響。
1、大豆多糖分離純化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:選擇臺灣75-1大豆(糖含量28.2%)為實(shí)驗(yàn)對象,采用熱
2、提-極性pH值法提取SSPS,確定實(shí)驗(yàn)條件為:堿脫蛋白料液比1:10,pH值9.5;酸提SSPS提取溫度120℃,pH4.0,得率為41.83%。使用離子交換樹脂色譜分離法純化多糖,確定上樣量為50mg,緩沖液pH值為6.8。分級得到兩個組分SSPS-1、SSPS-2,通過HPLC凝膠色譜和紫外譜圖確定SSPS-2的分子量為91.5kD,蛋白含量86.7%,為高結(jié)合蛋白含量的單一多糖。
2、SSPS-1組分的結(jié)構(gòu)分析表明:
3、SSPS-1含有5個單峰,相對分子量分別為733kD、295 kD、25 kD、6223D及1589D,含少量蛋白的雜多糖;SSPS-1經(jīng)過GC、紅外掃描及甲基化分析,確定其為β-吡喃糖,且含有較多糖醛酸,主鏈為鼠李糖與半乳糖醛酸,連接方式為1-3-Rha及1-4-GalA,其他組成糖為阿拉伯糖、半乳糖、木糖及甘露糖等。
3、DHPM對SSPS-1結(jié)構(gòu)的影響:對SSPS-1進(jìn)行DHPM處理,大分子量組分降低,小分子量組分降
4、低,中等分子量組分增加,分析DHPM對SSPS-1的作用方式可能為:大分子向低分子量轉(zhuǎn)化,低分子量向高分子量聚集。SSPS-1由原來的針狀堆積排列,向末端膨大呈球形的“火柴棒”狀有序排列結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變。
經(jīng)DHPM處理的SSPS-1主鏈的單糖Rha和GalA含量降低,側(cè)鏈部分的單糖Ara、Gal、Fuc、Man降低,Xyl、Glc、GlcA則未檢出。連接主鏈的糖苷鍵(1→3)鍵鼠李糖及(1→4)鍵半乳糖醛酸含量降低,而其主要支鏈
5、上的糖苷鍵的含量得到增加。DHPM處理會增加糖醛酸含量,但糖環(huán)構(gòu)型未改變。
4、DHPM對SSPS-1理化性質(zhì)的影響:SSPS-1隨著DHPM的處理次數(shù)的增加,粒徑分布、Zeta電位、表觀粘度,均呈現(xiàn)先降低,而后回升,最后降低的趨勢。SSPS-1經(jīng)DHPM150MPa處理4次后的乳化性、乳化穩(wěn)定性呈現(xiàn)出最大值。SSPS-1經(jīng)處理6次后,起泡性達(dá)到最大值,SSPS-1的起泡穩(wěn)定性在處理2次后達(dá)到最高峰。
5、D
6、HPM對SSPS-1生理功能的影響:健康小鼠喂食經(jīng)DHPM處理后的SSPS-1,其糞便菌群及腸道菌群中的雙歧桿菌數(shù)目和乳酸菌的數(shù)目均有所增加,大腸桿菌數(shù)目下降,即SSPS-1對有益菌(雙歧桿菌、乳酸菌)有增殖效果,對有害菌(大腸桿菌)有抑制效果。SSPS-1對兩種有益菌的增加比例相當(dāng),且高于有害菌的抑制比例。SSPS-1經(jīng)DHPM150MPa處理4次后,對有益菌的增殖比例最高,對大腸桿菌的抑制比例亦最高。
SSPS-1對膽
7、汁酸有一個吸附解析的過程,DHPM的作用使得SSPS-1對膽汁酸的吸附量增加,膽汁酸的釋放延長。SSPS-1對Ca2+、Mg2+是一個動態(tài)平衡過程,SSPS-1對Cu2+、Pb2+的吸附相對穩(wěn)定,呈緩慢釋放的現(xiàn)象。
綜上所述:DHPM的作用可使分級得到的SSPS分子排布向中等分子量靠攏,進(jìn)一步改變糖苷鍵比例、單糖組成、官能團(tuán),從而使SSPS的粒徑分布、表觀粘度及乳化起泡能力,對健康小鼠腸道、糞便菌群影響,對膽汁酸及Ca2+
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