截短側(cè)耳素發(fā)酵工藝研究.pdf

1、泰妙菌素是截短側(cè)耳素衍生的半合成抗生素，廣泛應(yīng)用于預(yù)防和治療雞慢性呼吸道病、豬地方性肺炎和豬痢疾，是控制豬支原體感染的首選藥物。截短側(cè)耳素是雙萜化合物，目前主要通過微生物發(fā)酵獲得，市場需求很大，而國內(nèi)生產(chǎn)能力相對(duì)較小，因此本論文主要針對(duì)截短側(cè)耳素發(fā)酵產(chǎn)量的提高展開，目的是開發(fā)一套簡單、低耗氧、高產(chǎn)量的發(fā)酵培養(yǎng)工藝。
　　 首先通過誘變選育的方法，篩選2-脫氧-D-葡萄糖抗性菌株，解除葡萄糖對(duì)產(chǎn)物積累的抑制。對(duì)誘變后的5000多株

2、進(jìn)行高通量的篩選，得到耐高濃度葡萄糖、低耗氧的高產(chǎn)菌株P(guān)mh4023，截短側(cè)耳素產(chǎn)量達(dá)到9423ug/ml，較出發(fā)菌株提高了60.6％。在搖瓶上通過單因子實(shí)驗(yàn)、PB實(shí)驗(yàn)及爬坡實(shí)驗(yàn)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行了系統(tǒng)優(yōu)化，得到了最優(yōu)的培養(yǎng)基配方：葡萄糖6％；玉米漿2.5％；黃豆餅粉0.5％；豆油3％；硝酸鈣0.08％；復(fù)合酵母粉0.4％；磷酸二氫鉀0.1％；硫酸鎂0.02％；氯化鈉0.0125％。系統(tǒng)研究了在工業(yè)生產(chǎn)規(guī)模條件下通氣量與溶氧對(duì)產(chǎn)物積累與菌絲生

3、長的影響，新菌種的低耗氧的特性使通風(fēng)量由原來的2200 m3/h減少為1600 m3/h，由于風(fēng)量降低，5發(fā)酵罐放罐體積平均增加5％，提高了截短側(cè)耳素產(chǎn)量與設(shè)備利用率。脈沖補(bǔ)糖實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，起始葡萄糖濃度40 g/l，過程中葡萄糖濃度控制在20～40 g/l，最有利于細(xì)胞生長和截短側(cè)耳素的積累，在此種培養(yǎng)模式下，截短側(cè)耳素產(chǎn)量迅速增加，240h達(dá)到最高17957ug/ml，發(fā)酵時(shí)間縮短了72h。在上述試驗(yàn)設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)上，通過對(duì)補(bǔ)料方法的研究，