杜仲葉抗疲勞活性成分的篩選及抗氧化性研究.pdf

1、杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.),落葉喬木,是我國(guó)特種經(jīng)濟(jì)林木。杜仲味甘、微辛,性溫,入肝、腎二經(jīng),具有補(bǔ)肝腎、壯筋骨的功效,其皮具有降血壓、降血糖、降血脂等多種功能。大量研究表明杜仲皮與杜仲葉化學(xué)成分相似,為了有效利用資源,現(xiàn)多采用以葉代皮。雖然已有大量文獻(xiàn)報(bào)道杜仲葉提取物具有抗疲勞作用,但是對(duì)其抗疲勞活性成分和作用機(jī)理的研究還很膚淺,尚未有實(shí)質(zhì)性的進(jìn)展和突破,至今仍存在功效成分不清,作用機(jī)理不明等問(wèn)題。本課題針

2、對(duì)上述問(wèn)題,采用化學(xué)篩選與生物活性篩選相結(jié)合的方法,通過(guò)小鼠抗疲勞試驗(yàn),對(duì)經(jīng)由溶劑提取、大孔吸附樹(shù)脂分離和溶劑萃取得到的各組分進(jìn)行活性追蹤,逐級(jí)篩選出具有高活性的有效部位和活性成分,并借助光譜分析等現(xiàn)代分析手段,對(duì)目的產(chǎn)物進(jìn)行初步的結(jié)構(gòu)分析。此外,通過(guò)體內(nèi)、體外抗氧化試驗(yàn),研究杜仲葉抗疲勞活性成分與其抗氧化作用的關(guān)系,探討其作用機(jī)制,為開(kāi)發(fā)以杜仲葉為功能性原料的第三代抗疲勞食品提供科學(xué)依據(jù)。試驗(yàn)主要研究成果:
　　 1抗疲勞試驗(yàn)

3、表明,杜仲葉經(jīng)80％乙醇提取、XDA-8型大孔樹(shù)脂吸附、乙醇梯度洗脫、溶劑逐級(jí)萃取后,得到20％乙醇洗脫部位和正丁醇萃取成分的活性較高,能顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間,降低血乳酸和血清尿素氮含量,提高肝糖原的含量。
　　 2常壓耐缺氧試驗(yàn)表明,杜仲葉提取物、一次分離純化物和二次分離純化物均未表現(xiàn)出顯著性差異,推斷杜仲葉抗疲勞活性與耐缺氧活性無(wú)關(guān)。
　　 3體外抗氧化試驗(yàn)表明,具有抗疲勞作用的20％乙醇洗脫部位和正丁醇萃取成分

4、均具有較好的清除·OH、DPPH和O2-·自由基的能力,并且其清除.OH及O2-·的效果優(yōu)于Vc,可有效抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的進(jìn)行。
　　 4體內(nèi)抗氧化試驗(yàn)表明,具有抗疲勞作用的20％乙醇洗脫部位和正丁醇萃取成分均能降低丙二醛的含量,提高超氧化物歧化酶的活性,據(jù)此推測(cè)杜仲葉抗疲勞作用機(jī)制可能與有效物質(zhì)的體內(nèi)抗氧化作用有關(guān)。
　　 5通過(guò)逐級(jí)篩選和初步的結(jié)構(gòu)分析,得到抗疲勞活性組分正丁醇萃取物主要為黃酮苷,此有效成分的抗疲勞