海藻多酚QSI對(duì)大菱鲆腐敗變質(zhì)調(diào)控的初步研究.pdf

1、本論文以25種海藻為研究對(duì)象，采用紫色桿菌(CV026)檢測(cè)體系篩選出了具有細(xì)菌群體感應(yīng)抑制活性的海藻多酚，用紫外、紅外光譜、高效液相色譜等方法初步測(cè)定了海藻多酚群體感應(yīng)抑制劑(Quorum Sensing Inhibitor，QSI)的結(jié)構(gòu)特征、化學(xué)組成。將海藻多酚QSI應(yīng)用于大菱鲆的保鮮，評(píng)價(jià)了海藻多酚QSI的保鮮效果及其對(duì)大菱鲆腐敗菌群體感應(yīng)的抑制作用。此研究豐富了以細(xì)菌群體感應(yīng)系統(tǒng)為靶點(diǎn)的水產(chǎn)品貯藏保鮮理論，也為水產(chǎn)品的保鮮提供

2、了新的思路與途徑。
　　 本論文研究?jī)?nèi)容包括以下3個(gè)部分：
　　 1.海藻多酚細(xì)菌群體感應(yīng)抑制劑(QSI)的篩選
　　 采用水提和醇提兩種方法對(duì)海藻多酚進(jìn)行提取，利用紫色桿菌Chromobacterium violaceum CV026生物感應(yīng)器雙檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)海藻多酚的細(xì)菌群體感應(yīng)抑制活性進(jìn)行篩選和檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，海藻的醇提多酚對(duì)細(xì)菌群體感應(yīng)有較高的抑制活性。然后利用醇提法對(duì)25種海藻的多酚進(jìn)行提取，并研究了海藻多

3、酚的群體感應(yīng)抑制活性，發(fā)現(xiàn)其中12種海藻中的多酚對(duì)細(xì)菌群體感應(yīng)具有抑制作用。以細(xì)菌群體感應(yīng)抑制活性為指標(biāo)，選取了石莼、馬尾藻和裙帶菜三種海藻中的多酚進(jìn)行了進(jìn)一步研究。結(jié)果表明：這三種海藻多酚對(duì)紫色桿菌紫色菌素的產(chǎn)生均具有抑制作用，并表現(xiàn)出對(duì)濃度的高度依賴性，當(dāng)多酚濃度在0.1-0.5mg/mL范圍時(shí)，能夠影響紫色桿菌CV026紫色菌素的產(chǎn)生但不影響其生長(zhǎng)。
　　 2.海藻多酚QSI特性及其化學(xué)組分測(cè)定
　　 采用紫外可見(jiàn)

4、分光光度計(jì)和紅外光譜儀對(duì)石莼、馬尾藻和裙帶菜多酚進(jìn)行掃描，分析初步結(jié)構(gòu)，并通過(guò)HPLC進(jìn)一步測(cè)定三種海藻多酚的化學(xué)組分及含量。分析表明：石莼、馬尾藻、裙帶菜多酚與沒(méi)食子酸、兒茶酚標(biāo)準(zhǔn)品在280 nm附近有類似的吸收峰，表明三種海藻多酚含有類似于沒(méi)食子酸、兒茶酚的苯環(huán)結(jié)構(gòu)。石莼、馬尾藻、裙帶菜多酚與沒(méi)食子酸、兒茶酚、間苯三酚的紅外吸收譜圖也具有相似之處，都具有明顯的酚羥基伸縮振動(dòng)、芳香環(huán)骨架伸縮振動(dòng)及在指紋區(qū)的特征吸收峰等。初步推斷所篩選

5、海藻多酚QSI具有沒(méi)食子酸、兒茶酚或間苯三酚相似的結(jié)構(gòu)。三種海藻多酚的化學(xué)組成雖然具有較大差異，但都含有表兒茶素及兒茶酚，且以兒茶酚含量最高。
　　 3.海藻多酚QSI對(duì)大菱鲆腐敗變質(zhì)及其腐敗菌群體感應(yīng)調(diào)控初探
　　 用濃度為0.5 mg/mL的三種海藻多酚QSI對(duì)大菱鲆進(jìn)行處理，4℃貯藏，定期進(jìn)行感官評(píng)定、菌落總數(shù)、揮發(fā)性鹽基氮、pH值等腐敗指標(biāo)的測(cè)定。通過(guò)涂平板法用CV026紫色桿菌檢測(cè)體系測(cè)定不同貯藏時(shí)期的大菱鲆魚(yú)

6、肉菌落及其群體感應(yīng)現(xiàn)象。結(jié)果表明：大菱鲆的菌落總數(shù)、pH值、揮發(fā)性鹽基氮(TVB-N)均隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而增長(zhǎng)，這與感官評(píng)定的結(jié)果相吻合。海藻多酚QSI處理的樣品菌落總數(shù)增長(zhǎng)速度均明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，其中石莼多酚處理組菌落總數(shù)增長(zhǎng)速度最慢，裙帶菜多酚對(duì)大菱鲆細(xì)菌總數(shù)的調(diào)控作用最差，但仍然好于對(duì)照組。在大菱鲆的貯藏期間，對(duì)照組在腐敗后期出現(xiàn)了一定的紫色現(xiàn)象，表明有群體感應(yīng)信號(hào)分子的產(chǎn)生，其它處理組均沒(méi)有出現(xiàn)紫色現(xiàn)象，而對(duì)新鮮