凡納濱對蝦特定腐敗菌中AHLs介導(dǎo)的群體感應(yīng)與調(diào)控的初步研究.pdf

1、本論文研究了凡納濱對蝦冰溫貯藏條件下菌相組成變化與優(yōu)勢腐敗菌的群體感應(yīng)現(xiàn)象，通過群體感應(yīng)抑制劑處理，研究了群體感應(yīng)抑制劑對凡納濱對蝦特定腐敗菌的群體感應(yīng)的調(diào)控及對凡納濱對蝦腐敗變質(zhì)的抑制作用。此研究豐富了以群體感應(yīng)為靶點(diǎn)的水產(chǎn)品貯藏保鮮理論，也為水產(chǎn)品的保鮮提供了新的思路與途徑。
　　 本論文的研究內(nèi)容包括以下4個(gè)部分：
　　 1.研究了冰溫貯藏條件下凡納濱對蝦的菌相組成。在冰溫貯藏條件下，從凡納濱對蝦蝦肉中分離純化得到

2、463株細(xì)菌，通過形態(tài)、運(yùn)動(dòng)性、理化實(shí)驗(yàn)、16SrDNA對其進(jìn)行了鑒定。結(jié)果表明，在冰溫貯藏過程中，凡納濱對蝦的初始菌相和腐敗菌相中革蘭氏陰性菌均占90％以上。腐敗菌相中，不動(dòng)桿菌(50.6％)和黃桿菌-噬纖維菌群(36.14％)為優(yōu)勢腐敗菌。
　　 2.研究了凡納濱對蝦特定腐敗菌Aci-1、Aci-2 N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯(AHLs)的產(chǎn)生及活性變化。利用紫色桿菌Chromobacterium violaceum CV026和

3、根癌農(nóng)桿菌Agrobacterium tumefaciens A136(pCF218/pCF372)生物感應(yīng)器雙檢測系統(tǒng)檢測了兩株優(yōu)勢腐敗菌不動(dòng)桿菌1(Aci-1)和不動(dòng)桿菌2(Aci-2)的AHLs的產(chǎn)生情況。結(jié)果表明，Aci-1和Aci-2兩株菌均能產(chǎn)生AHLs信號分子，且隨著菌株濃度的增加，兩株菌的AHls含量也增加。Aci-1和Aci-2中AHLs的產(chǎn)生受環(huán)境pH的影響，pH值過高將對信號分子的產(chǎn)生起到破壞作用。對Aci-1生物

4、膜的研究發(fā)現(xiàn)，信號分子的添加量與其生物膜的生長量呈正相關(guān)，說明在不動(dòng)桿菌中，其生物膜的形成受信號分子AHLs的調(diào)控。
　　 3.研究了群體感應(yīng)抑制劑對Aci-1、Aci-0群體感應(yīng)的調(diào)控。以裙帶菜為原料提取群體感應(yīng)抑制劑，通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)確定了最佳提取工藝條件，即乙醇濃度75％，浸提時(shí)間3h，料液比1:6(g/mL)，浸提溫度65℃。群體感應(yīng)抑制劑對Aci-1、Aci-2的信號分子AHLs的產(chǎn)生及生物膜的形成均具有一定的

5、抑制作用，且抑制作用與群體感應(yīng)抑制劑濃度呈正相關(guān)性。
　　 4.研究了凡納濱對蝦冰溫貯藏過程中AHLs的產(chǎn)生規(guī)律與其腐敗指標(biāo)之間的關(guān)系以及群體感應(yīng)抑制劑對其腐敗過程的調(diào)控。凡納濱對蝦冰溫貯藏過程中，AHLs的含量在貯藏4d時(shí)達(dá)最大，爾后隨著貯藏時(shí)間的延長AHLs的濃度呈現(xiàn)下降趨勢。群體感應(yīng)抑制劑可降低對蝦中AHLs的含量。同時(shí)，群體感應(yīng)抑制劑可抑制凡納濱對蝦的腐敗變質(zhì)，保持凡納濱對蝦的新鮮品質(zhì)，延長貯藏期。通過分析凡納濱對蝦貯藏