多氧霉素與尼可霉素的代謝工程與組合生物合成研究.pdf

1、多氧霉素與尼可霉素作為幾丁質合成酶的特異性抑制劑，不僅具有廣譜的抗真菌活性，并且對動植物毒性較低。這兩個抗生素的化學結構較為相似，都是由一個或兩個獨立合成的肽基與一個核苷骨架在不同位置組裝而成。此外，這兩個抗生素的生物合成基因簇中相關基因同源性也較高。基于此，我們設計了四個多氧霉素與尼可霉素的雜合抗生素。
　　本研究首先克隆了唐德鏈霉菌中尼可霉素的生物合成基因簇，并根據(jù)雜合抗生素的化學結構需要，運用PCR打靶技術對特定尼可霉素生物

2、合成基因進行敲除，突變后的黏粒接合轉移入改造過的多氧霉素工業(yè)菌株中進行異源表達。通過對抗生素產(chǎn)生菌的生物合成途徑進行改造，得到若干重組菌株。
　　重組菌株的發(fā)酵產(chǎn)物純化后經(jīng)質譜和核磁共振分析，確定得到了目標的四個雜合肽核苷類抗生素(polyoxin N, nikkoxin B, nikkoxin C and nikkoxin D)的定向產(chǎn)生。本研究所產(chǎn)生的四個雜合抗生素對多數(shù)參與測試的人類或植物病原真菌具有良好的抑制作用。其中ni