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文檔簡介
1、HET1是Db(l)蛋白結(jié)構(gòu)域家族的一類鳥苷酸交換因子,它能夠調(diào)節(jié)Rho家族的G蛋白與GDP或GTP的結(jié)合狀態(tài)。當(dāng)G蛋白與GTP連接,其GTPase活性激活,其下游效應(yīng)蛋白被激活,傳遞細(xì)胞信號(hào);當(dāng)G蛋白與GDP結(jié)合時(shí),其GTPase失活,則不發(fā)揮作用。HET1對(duì)Rac1、Cdc42和RhoA結(jié)合GTP狀態(tài)和GDP結(jié)合狀態(tài)之間的轉(zhuǎn)換,具有重要調(diào)控作用。HET1在腦、心臟、肌肉等興奮組織中廣泛并高表達(dá),它能通過對(duì)小G蛋白的激活調(diào)控,進(jìn)而影響
2、細(xì)胞形狀、分裂、遷移,細(xì)胞極性和細(xì)胞粘連。以往的研究表明,肌肉損傷后HET1表達(dá)上調(diào),并且利用腺病毒外源性過表達(dá)HET1能加快肌肉損傷的修復(fù),并且Rac1,Cdc42和RhoA GTPase激活。在體外C2C12細(xì)胞系中,HET1能促使C2C12向肌細(xì)胞分化,并抑制其向脂肪細(xì)胞分化。盡管如此,由于體內(nèi)基因敲除小鼠模型的缺乏,Het1在體內(nèi)肌肉再生和分化中的功能仍不清楚,我們首次建立了Het1fl/fl小鼠,使之與EII-Cre轉(zhuǎn)基因小鼠
3、雜交,得到HET1全敲小鼠,PCR與Southern的結(jié)果都顯示,HET1全敲小鼠中基因片段的剔除。但是全敲小鼠與野生型小鼠的生活狀況無明顯差異,而且心、肌肉、胃和腸的組織切片對(duì)比,觀察發(fā)現(xiàn)兩者無明顯區(qū)別。我們利用注射心臟毒素(CTX)成功誘導(dǎo)了一個(gè)肌肉損傷和修復(fù)的模型。我們向小鼠骨骼肌注射50μl的10μg/ml的心臟毒,通過檢測(cè)c-myc、MyoD和myogenin因子發(fā)現(xiàn),在注射CTX5天后,肌肉衛(wèi)星細(xì)胞增殖和向肌細(xì)胞分化達(dá)到頂峰
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