棉籽蛋白酶水解研究——微波輔助法與常規(guī)法比較.pdf

1、棉籽蛋白氨基酸組成齊全，其必需氨基酸組成與FAO標(biāo)準(zhǔn)相比具有較好的平衡特點，營養(yǎng)價值較高。棉籽蛋白不僅是重要的飼料蛋白來源，更是人類可食用的優(yōu)質(zhì)植物蛋白。本論文研究了棉籽分離蛋白提取工藝、功能性質(zhì);通過酶解制備棉籽蛋白肽，優(yōu)化了棉籽蛋白肽的檢測條件;比較了常規(guī)與微波輔助酶解方法對肽得率影響，優(yōu)化了微波輔助酶解條件;研究了酶解產(chǎn)物的抗氧化活性。其結(jié)果如下:
　　 1、堿溶酸沉法提取棉籽分離蛋白的最佳條件為:pH11.0，溫度45℃

2、，提取時間2h，料液比1:25。提取液離心過濾，調(diào)節(jié)上清液pH到4.5進(jìn)行沉淀，離心過濾，沉淀經(jīng)冷凍干燥后得棉籽分離蛋白產(chǎn)品。在此條件下蛋白質(zhì)提取率為70.45％，蛋白質(zhì)含量為96.97％，游離棉酚含量為45.85mg/kg。對棉籽分離蛋白吸水性、吸油性、溶解性、乳化性、乳化穩(wěn)定性、起泡性和泡沫穩(wěn)定性進(jìn)行分析后得出棉籽分離蛋白具有較好的食品功能性質(zhì)，可應(yīng)用于食品中。
　　 2、對棉籽蛋白酶解液中肽分子質(zhì)量分布的測定條件進(jìn)行了優(yōu)化

3、。選擇細(xì)胞色素C、抑肽酶、桿菌肽、氧化型谷胱甘肽和還原型谷胱甘肽作為標(biāo)準(zhǔn)分子質(zhì)量物質(zhì)，得到保留時間與分子質(zhì)量關(guān)系方程為Y=-4125.6X+45264，R2=0.9982，其中Y為分子質(zhì)量，X為保留時間。
　　 3、粗棉籽蛋白常規(guī)酶解的最優(yōu)條件為:第一步，底物濃度5％，溫度60℃，體系pH8.0，堿性蛋白酶添加量3％，酶解時間6h;第二步，溫度50℃，反應(yīng)體系pH7.0，風(fēng)味蛋白酶添加量4％，酶解4h。在此條件下，棉籽蛋白的水解

4、度為25.74％，肽得率為64.33％。
　　 4、采用超聲波、微波、超聲波加微波三種預(yù)處理方式對原料進(jìn)行處理，與對照組相比，微波輔助酶解前的預(yù)處理能夠提高棉籽蛋白肽的得率，且超聲波加微波比與其他方式相比效果顯著;預(yù)處理前調(diào)節(jié)pH值到8.0，比自然pH酶解有利于肽得率的提高;底物濃度5％比底物濃度10％酶解后得到肽的得率高;堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶聯(lián)合使用比單一使用得到更多的肽。
　　 5、響應(yīng)面試驗優(yōu)化的粗棉籽蛋白最佳微

5、波輔助酶解條件為:底物濃度5.06％、加酶量5.83％、微波功率44.63W、酶解時間59.70min、pH為8.0，溫度60℃。此條件下棉籽蛋白酶解的肽得率為58.39％。
　　 6、響應(yīng)面試驗優(yōu)化的棉籽分離蛋白最佳微波輔助酶解條件為:底物濃度4.08％、中性蛋白酶加酶量14.45％、微波功率39.18W、酶解時間為60min、pH為7.0，溫度40℃。在此條件下，得到的酶解液中肽得率為79.82％。對酶解物進(jìn)行超濾分級并利用