以中藥為基質(zhì)的黑木耳多糖發(fā)酵工藝條件的研究.pdf

1、黑木耳是一種營(yíng)養(yǎng)豐富的藥、食兩用真菌。黑木耳中含有的黑木耳多糖因具有降血糖、降血脂、抗腫瘤以及抗凝血等生理活性而成為研究熱點(diǎn)。本文通過(guò)添加適當(dāng)?shù)馁F州特色中藥成分，以促進(jìn)深層發(fā)酵黑木耳多糖的產(chǎn)量。研究了黑木耳多糖的搖瓶發(fā)酵工藝和胞外多糖提取工藝，并在15L發(fā)酵罐上進(jìn)行發(fā)酵工藝試驗(yàn)。 首先考察了六種貴州特色中藥的水提取液和乙醇提取液對(duì)黑木耳深層發(fā)酵的影響。結(jié)果表明所有中藥的水提取液均可以在不同程度上促進(jìn)黑木耳胞外多糖的產(chǎn)量。但是乙醇

2、提取液對(duì)黑木耳胞外多糖產(chǎn)量的促抑效果不一。最終綜合生物量與胞外多糖產(chǎn)量?jī)身?xiàng)指標(biāo)，選擇天麻乙醇提取液作為后續(xù)試驗(yàn)的添加成分。 單因素試驗(yàn)研究了各種營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)黑木耳深層發(fā)酵的影響，結(jié)果表明葡萄糖、酵母膏、天麻乙醇提取液和無(wú)機(jī)鹽，在一定濃度下有利于黑木耳菌體生長(zhǎng)和胞外多糖的形成。進(jìn)一步用響應(yīng)面法優(yōu)化了培養(yǎng)基配方，確定了黑木耳深層發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖37.81g/L、酵母膏10.23g/L、天麻乙醇提取液30.00g/L：KH2PO43

3、.94g/L、MgSO41.97g/L。采用此培養(yǎng)基后，黑木耳胞外多糖產(chǎn)量達(dá)到了2.65g/L。 通過(guò)試驗(yàn)確定了黑木耳深層發(fā)酵的適宜工藝條件為：初始pH5.66(自然)、接種量10％、種齡4-5d，培養(yǎng)溫度28℃、250mL搖瓶裝液量80mL。 通過(guò)試驗(yàn)得出，黑木耳發(fā)酵液胞外多糖最佳提取工藝為：第一步沉淀時(shí)采用30％的乙醇濃度，第二步沉淀時(shí)采用75％的乙醇濃度；靜置溫度為4℃；靜置時(shí)間為24h。此工藝條件提取黑木耳胞外多

4、糖較為合適。 在15L發(fā)酵罐上進(jìn)行發(fā)酵工藝條件小試研究。通氣量試驗(yàn)結(jié)果表明較高通氣量有利于黑木耳深層發(fā)酵的發(fā)酵結(jié)果，綜合考慮生產(chǎn)實(shí)際選擇6v/v/m為宜。兩段溫度控制試驗(yàn)結(jié)果表明28℃適合菌絲體生長(zhǎng)，25℃適宜胞外多糖的生成。所以0-84h宜采用28℃培養(yǎng)，84-144h宜采用25℃培養(yǎng)。兩段pH控制試驗(yàn)結(jié)果表明，pH5.1適合黑木耳菌絲體生長(zhǎng)，pH5.7有利于胞外多糖的生成。所以，0-84h宜采用pH5.1培養(yǎng)，84-144h