高糖和高胰島素對MCF-7-ADR細胞P-糖蛋白表達和功能的影響.pdf

1、目的：
　　檢測MCF-7/ADR細胞中P-糖蛋白存在的情況，分析高糖、高胰島素對P-糖蛋白表達和功能的影響，對糖尿病乳腺癌患者化療耐藥情況進行初步探討。
　　方法：
　　用不同糖濃度和不同胰島素濃度的全細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)MCF-7/ADR細胞，分別采用Real-time PCR法檢測細胞中Mdr1 mRNA的表達量和Western Blot法檢測細胞中P-糖蛋白含量，以及羅丹明123熒光實驗測定目的蛋白的功能變化。同時，

2、用熒光顯微鏡檢測以上實驗的葡萄糖濃度是否能夠可以引起細胞凋亡，以排除凋亡對目的蛋白表達的影響。
　　結果：
　　(1)Mdr1 mRNA的相對表達量隨葡萄糖濃度的增加，在11.1 mmol/l明顯增高，此后又迅速降低，11.1～27.8mmol/l葡萄糖濃度組與5.6mmol/l葡萄糖濃度組比較，Mdr1的表達量均存在顯著差異；Mdr1 mRNA的表達量隨果糖濃度的增加，在5.6～16.7mmol/l果糖濃度組之間逐漸降低，

3、在22.2、27.8mmol/l果糖濃度組又逐漸增高，11.1～27.8mmol/l果糖濃度組的表達量與5.6mmol/l果糖濃度組比較，差異均有統(tǒng)計學意義；Mdr1表達量隨細胞培養(yǎng)基中胰島素濃度的增加，逐漸降低，0.005～0.01μmol/l胰島素濃度組與不含胰島素組比較，兩組Mdr1 mRNA的表達量存在統(tǒng)計學差異。
　　(2)P-糖蛋白表達量隨葡萄糖濃度的增高而變化，先增高(11.1mmol/l)，后逐漸減低(16.7～2

4、7.8mmol/l)。5.6mmol/l葡萄糖濃度組P-糖蛋白表達量明顯高于16.7～27.8mmol/l葡萄糖濃度組(P<0.001)；P-糖蛋白表達量隨胰島素濃度的增高，逐漸減低。且0，0.001μmol/l胰島素濃度組的P-糖蛋白表達水平明顯高于0.005和0.01μmol/l胰島素濃度組(P<0.001)。
　　(3)P-糖蛋白功能隨葡萄糖和胰島素濃度的增高，逐漸降低，降低程度明顯，存在統(tǒng)計學差異。
　　結論：