孕期高脂飲食誘導(dǎo)母鼠糖耐量受損及對子代胰腺β細(xì)胞InsR及IRS-1表達(dá)的影響.pdf

1、本研究分為二部分： 第一部分、孕期高脂肪飲食誘導(dǎo)母鼠胰島素抵抗及糖脂代謝紊亂 目的：觀察孕期高脂肪飲食對正常孕鼠葡萄糖耐量、酯類代謝以及胰島素敏感性的影響，初步探討膳食脂肪與妊娠期糖尿?。℅DM）發(fā)病間的關(guān)系。 方法：選擇8周齡健康雌性Wistar大鼠20只、雄性Wistar大鼠10只，適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后，雌、雄鼠以1：1比例合籠受孕１周，按受孕順序?qū)⒃惺箅S機(jī)分為普通飼料組（NC組，n=10）、高脂飼料組（HF組，

2、n=10）。NC組大鼠孕期全程喂養(yǎng)普通飼料，HF組大鼠孕期全程喂養(yǎng)高脂肪飼料（脂肪供熱比約占59％，以富含飽和脂肪酸的豬油為主）。飼養(yǎng)期間，觀察大鼠進(jìn)食量和體重變化，交配前及孕20天抽血測空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)、血甘油三脂（TG）和膽固醇（TC）濃度，并計算胰島素敏感性指數(shù)（ISI）和HOMA模型的胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)。禁食12h過夜，于孕20天時，對兩組孕鼠行口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)。 結(jié)

3、果：1.體重變化 HF組孕1周、2周、3周大鼠體重(BW)以及孕期增重與同期NC組比較顯著增加(P<0.05或P<0.01)。2.血脂變化 與NC組比較，孕20天時HF組血清TG和TC均顯著性升高（P<0.05或P<0.01）。 3．FBG和FINSHF組FBG和FINS水平在孕20天時較NC組升高，有顯著性差異（P<0.05或P<0.01）。4.胰島素敏感性 HF組孕20天時ISI較NC組降低，有顯著性差異（P<0.01）；而H

4、OMA-IR較NC組升高，有顯著性差異（P<0.01）。5.OGTT 結(jié)果 HF組的0min、60min、120min 3個時點(diǎn)血糖與NC組比較，均顯著升高(P<0.05或0.01)。但30min時點(diǎn)血糖無顯著性差異（P>0.05）。 結(jié)論：孕期高脂肪飲食，可使大鼠孕期體重明顯增加；晚孕期血糖、血酯及空腹胰島素水平升高，葡萄糖耐量明顯受損，機(jī)體胰島素敏感性降低，出現(xiàn)胰島素抵抗。 第二部分、孕期高脂肪飲食對子代胰腺β細(xì)胞

5、胰島素受體及胰島素受體底物表達(dá)的影響 目的：大量流行病學(xué)研究和動物實驗已證實子宮內(nèi)和新生兒的營養(yǎng)狀態(tài)，可改變多個器官、系統(tǒng)的發(fā)育，永久的影響它們的功能，改變子代日后對某些慢性疾病的易感性。母體營養(yǎng)過?；蚋咧撅嬍?，可導(dǎo)致子代成年后易患2型糖尿病。 近年來，在對2型糖尿病的研究中發(fā)現(xiàn)胰島素對胰腺β細(xì)胞本身存在正反饋調(diào)節(jié)，它可以促進(jìn)β細(xì)胞合成和分泌胰島素，當(dāng)β細(xì)胞胰島素信號途徑任何環(huán)節(jié)的障礙均可能導(dǎo)致β細(xì)胞水平上的胰島素抵抗

6、（胰島素“中心性抵抗”），引起胰島素分泌缺陷。胰島素受體（InsR）、胰島素受體底物-1（IRS-1）是胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的重要蛋白，它們表達(dá)水平減低可以引起胰島β細(xì)胞水平上胰島素抵抗，胰島素分泌減少，進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體易患2型糖尿病。 本研究旨在通過研究孕期高脂肪飲食對子代胰腺β細(xì)胞InsR和IRS-1表達(dá)的影響，即是否可導(dǎo)致β細(xì)胞水平上的胰島素抵抗，初步探討了孕期高脂肪飲食導(dǎo)致子代成年后易患2型糖尿病的某方面機(jī)制。 方法

7、：HF組大鼠孕期全程高脂肪飲食（富含飽和脂肪酸的豬油為主），NC組大鼠孕期全程喂養(yǎng)普通飼料，所有孕鼠自然分娩，稱重新生鼠體重，記錄胎仔數(shù)。分娩后兩組母鼠都飼以普通飼料，仔鼠由母乳喂養(yǎng)。幼鼠滿3周后斷乳，隨機(jī)挑選10只不同窩別的HF組幼鼠及相同數(shù)量的對照組幼鼠，禁食12h，采血測空腹血糖（FBG)、分離血清備測空腹胰島素(FINS)。采血后立即處死，迅速取胰腺組織，4％甲醛固定。HE染色觀察2組子代鼠胰腺病理結(jié)構(gòu)；免疫組織化學(xué)染色，圖像分

8、析檢測InsR及IRS－1在兩組幼鼠胰島的表達(dá)差別。 結(jié)果：1.體重變化 HF組子代鼠（OHF）出生體重和胎仔數(shù)與NC組無顯著性差異。但1周齡、2周齡、3周齡時的體重均低于NC組子代（ONC）。(P<0.05或P<0.01)。 2．FBG和FINS的變化 3周齡OHF組幼鼠FBG和同齡ONC組無顯著性差異，而胰島素水平顯著降低（P<0.01）3.胰腺病理結(jié)構(gòu) HE染色后，在光鏡下觀察，兩組鼠胰腺病理結(jié)構(gòu)未見明顯差異。4.免