母鼠孕期感染流感病毒對(duì)子代情緒及行為的影響.pdf

1、目的：
　　孕期感染可導(dǎo)致子代腦部發(fā)育異常，這些異常涉及神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)，神經(jīng)元的代謝、腦部神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表達(dá)、信號(hào)傳遞等；從而使子代出現(xiàn)意識(shí)喪失、學(xué)習(xí)認(rèn)知下降、行動(dòng)行為改變、情緒障礙等異常。而流感病毒引起的孕期感染，具體會(huì)引起子代哪些異常行為；同時(shí)孕期感染流感是否會(huì)惡化子代在面對(duì)后天應(yīng)激時(shí)，在情緒和行為方面的異常，均不明確。本研究探討甲型流感病毒A/PR/8（PR8）引起的孕期感染，對(duì)子代青春期的情緒行為、大腦內(nèi)炎癥因子、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)

2、因子和神經(jīng)遞質(zhì)的影響；繼而用慢性不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激聯(lián)合孤養(yǎng)，觀察孕期感染是否會(huì)使感染組子代面對(duì)應(yīng)激時(shí)，在其行為和大腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)存在更為嚴(yán)重的影響。這將為流感引起的孕期感染對(duì)子代情緒及行為的影響提供必要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　⑴構(gòu)建孕期感染流感病毒小鼠模型：將10周齡的BALB/c雌鼠與雄鼠交配，觀察到陰道栓的雌鼠被確認(rèn)為懷孕第0.5天。在懷孕第7-9天，用流感病毒PR8或生理鹽水滴鼻。⑵孕期滴鼻PR8的子代設(shè)為實(shí)驗(yàn)組（FL

3、U組），孕期滴鼻生理鹽的子代小鼠設(shè)為對(duì)照組（CON組），隨機(jī)選取5周齡子代小鼠，利用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)大腦皮層和海馬內(nèi)腫瘤壞死因子α（TNFα）、白介素6（IL-6）和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）的mRNA表達(dá)水平。利用Elisa檢測(cè)大腦內(nèi)五羥色胺（5-HT）及去甲腎上腺素（NE）含量。⑶對(duì)另一部分發(fā)育至5周齡的子代小鼠進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試，包括糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、高架十字迷宮、Y字迷宮和強(qiáng)迫游泳。行為學(xué)測(cè)試后，對(duì)子代小鼠進(jìn)行為期4周的

4、慢性不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激聯(lián)合孤養(yǎng)，模擬子代成年后面對(duì)的環(huán)境壓力，對(duì)應(yīng)激后子代小鼠進(jìn)行第二輪行為學(xué)測(cè)試。最后用Elisa檢測(cè)大腦內(nèi)5-HT及NE的含量。⑷統(tǒng)計(jì)學(xué)方法根據(jù)數(shù)據(jù)類型，選擇獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)或獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn)。
　　結(jié)果：
　　①青春期子代小鼠，糖水偏好實(shí)驗(yàn)顯示實(shí)驗(yàn)組攝取糖水百分比顯著少于對(duì)照組。曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)顯示在總活動(dòng)路程和總活動(dòng)時(shí)間無(wú)差異的情況下，實(shí)驗(yàn)組在中央活動(dòng)路程和時(shí)間上，均顯著長(zhǎng)于對(duì)照組。高架十字迷宮顯示實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組

5、在總?cè)氡鄞螖?shù)無(wú)差異的情況下，實(shí)驗(yàn)組進(jìn)入開(kāi)放臂的次數(shù)更多，在開(kāi)放臂滯留時(shí)間更長(zhǎng)，在開(kāi)放臂路程也更長(zhǎng)。Y字迷宮和強(qiáng)迫游泳顯示實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間均無(wú)差異。大腦皮層內(nèi)TNFα、IL-6和BDNF的mRNA表達(dá)下調(diào)，海馬內(nèi)TNFα和BDNF的mRNA表達(dá)上調(diào)。大腦內(nèi)5-HT和NE含量與對(duì)照組相比，并無(wú)差異。②慢性不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激聯(lián)合孤養(yǎng)后，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組在情緒，行為和大腦內(nèi)5-HT和NE含量上均無(wú)差異。
　　結(jié)論：
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6、毒PR8，其子代小鼠在青春期，伴有躁狂和抑郁兩種情緒，且以躁狂情緒為主；空間記憶能力上與對(duì)照組相比，并無(wú)差異；大腦皮層處于抑炎狀態(tài)，海馬處于炎癥狀態(tài)；以上異常與大腦內(nèi)5-HT和NE的含量無(wú)關(guān)聯(lián)。⑵孕期感染流感病毒PR8，其子代小鼠在成年后，經(jīng)過(guò)4周慢性不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激聯(lián)合孤養(yǎng)，在情緒、行為、空間記憶能力及大腦內(nèi)5-HT和NE的含量上與對(duì)照組相比，均無(wú)差異。即面對(duì)后天應(yīng)激時(shí)，孕期感染流感病毒PR8并不會(huì)對(duì)子代的情緒、行為和大腦內(nèi)5-HT和N