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文檔簡介
1、小麥活性肽是植物源食物活性肽,已有的研究顯示小麥活性肽具有豐富的生物學(xué)功能,如抗氧化、抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性、阿片活性、免疫調(diào)節(jié)等,然而體內(nèi)試驗的研究較少,所以本文擬探討小麥低聚肽對大鼠氮代謝和胃腸保護(hù)作用的影響以及作用機制。研究主要包括以下四個部分:
第一部分:小麥低聚肽對大鼠氮代謝以及胃腸黏膜結(jié)構(gòu)和功能的影響
目的:觀察灌胃小麥低聚肽對于大鼠氮代謝、胃腸道上皮細(xì)胞形態(tài)和胃腸道關(guān)鍵消化酶活性的影響。
方
2、法:SD大鼠50只,隨機分為空白組,低、中、高劑量小麥低聚肽組和小麥蛋白組,每天灌胃1次。分別于第10、20、30d用代謝籠采集大鼠24h糞、尿樣品。連續(xù)灌胃30d,處死所有大鼠,取血清、胃和小腸黏膜,觀察氮代謝指標(biāo)、血清生化指標(biāo)、胃腸內(nèi)表面掃描電鏡、胃腸道消化酶活等的變化。
結(jié)果:灌胃30d后,低劑量小麥低聚肽能顯著提高大鼠蛋白質(zhì)表觀消化率、氮沉積、凈蛋白質(zhì)利用率;低、中劑量小麥低聚肽均能顯著增加蛋白質(zhì)生物學(xué)價值。低、中、高
3、劑量小麥低聚肽均能顯著增加大鼠血清總蛋白含量。低、中劑量小麥低聚肽組大鼠胃腸道上皮細(xì)胞較空白對照組飽滿、連接緊密,排列整齊有序。低、中劑量小麥低聚肽均能顯著上調(diào)大鼠胃蛋白酶的活力;低、中、高劑量小麥低聚肽均能顯著上調(diào)大鼠小腸黏膜氨基肽酶活力;中、高劑量小麥低聚肽均能上調(diào)大鼠小腸黏膜Na+-K+-ATP酶活力。
結(jié)論:一定劑量的小麥低聚肽能提高大鼠對于蛋白質(zhì)的吸收與利用,其可能的途徑是:(1)促進(jìn)胃腸道上皮細(xì)胞的生長;(2)胃蛋
4、白酶、小腸黏膜氨基肽酶、Na+-K+-ATP酶活力的上調(diào)。
第二部分:小麥低聚肽對非甾體類藥物致大鼠腸損傷的保護(hù)作用
目的:通過非甾體類藥物誘導(dǎo)的小腸損傷和氧化應(yīng)激動物模型,來觀察小麥低聚肽對小腸可能的保護(hù)作用。
方法:不同劑量的小麥低聚肽和小麥蛋白灌胃大鼠30d。大鼠處死前,用非甾體類藥物灌胃損傷大鼠小腸2次。取大鼠血清和小腸黏膜組織,觀察血清細(xì)胞因子、小腸病理切片、小腸黏膜抗氧化酶和阿片受體mRNA表達(dá)
5、的變化。
結(jié)果:小麥低聚肽可以減少小腸水腫和損傷,顯著降低了血清中TNF-α含量。非甾體類藥物可以顯著增加小腸黏膜的氧化應(yīng)激水平,小麥低聚肽有一定的抗氧化功效。同時小麥低聚肽能上調(diào)小腸黏膜中GSH-Px的活力。另外小麥低聚肽可以顯著下調(diào)mu-阿片受體mRNA的表達(dá)。
結(jié)論:非甾體類藥物可以誘導(dǎo)大鼠小腸損傷的模型,小麥低聚肽可能是一個可以有效減少大鼠腸損傷和抗氧化的工具。
第三部分:小麥低聚肽對非甾體類藥物致
6、大鼠胃損傷的保護(hù)作用
目的:通過非甾體類藥物誘導(dǎo)的胃損傷和氧化應(yīng)激動物模型,來觀察小麥低聚肽可能的保護(hù)作用。
方法:動物分組同第二部分。取大鼠胃體的相同部位,觀察胃體病理切片、胃體組織中抗氧化酶活、iNOS活力、NO含量和阿片受體、iNOS mRNA表達(dá)的變化。
結(jié)果:小麥低聚肽可以減少大鼠胃體上皮細(xì)胞變性和損傷,顯著降低了胃體的組織中氧化應(yīng)激水平和NO含量,小麥低聚肽有一定的抗氧化功效。同時小麥低聚肽能顯
7、著上調(diào)胃體的組織中SOD和GSH-Px的活力,下調(diào)iNOS的活力。另外小麥低聚肽可以顯著下調(diào)mu-阿片受體mRNA的表達(dá)。
結(jié)論:非甾體類藥物可以誘導(dǎo)大鼠胃損傷的模型,小麥低聚肽可能是一種有效減少大鼠胃損傷和抗氧化的活性物質(zhì)。保護(hù)途徑與其能上調(diào)抗氧化應(yīng)激酶活力,抑制胃體的組織中NO的生成,下調(diào)mu-阿片受體mRNA的表達(dá)有關(guān)。
第四部分:小麥低聚肽對吲哚美辛致IEC-6細(xì)胞系損傷的保護(hù)作用及分子機制
目的:
8、前期研究顯示小麥低聚肽可以減少非甾體類藥物對小腸上皮細(xì)胞的損傷,但是分子機制并不清楚。本研究利用吲哚美辛誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的模型,觀察小麥低聚肽對IEC-6細(xì)胞系ERK, NF-κB信號通路的影響。
方法:(0,125,500和2000 mg/L)小麥低聚肽預(yù)處理IEC-6細(xì)胞系24h,90 mg/L吲哚美辛損傷12h后,裂解細(xì)胞。觀察IEC-6細(xì)胞系抗氧化酶活力,MDA含量,p-ERK1/2、NF-κB p65的蛋白
9、表達(dá),COX、iNOS活力,PGE-2、NO含量的變化。
結(jié)果:小麥低聚肽可以顯著上調(diào)IEC-6細(xì)胞系SOD和GSH-Px活力。2000 mg/L小麥低聚肽可以顯著抑制IEC-6細(xì)胞系p-ERK1/2、NF-κBp65的表達(dá)。小麥低聚肽預(yù)處理最終可以顯著減少IEC-6細(xì)胞中MDA、NO的含量,增加腸上皮細(xì)胞PGE-2的合成。
結(jié)論:小麥低聚肽對于吲哚美辛誘導(dǎo)IEC-6細(xì)胞系損傷的保護(hù)作用的分子機制可能與其抑制胞內(nèi)ER
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