EPO對缺氧缺糖受損神經(jīng)細(xì)胞的作用研究.pdf

1、目的:建立缺氧缺糖神經(jīng)細(xì)胞損傷模型,探討EPO發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的可能機(jī)制,希望為EPO在神經(jīng)系統(tǒng)疾病的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　方法:將出生后24h內(nèi)C57BL/6小鼠的大腦皮質(zhì)神經(jīng)元原代培養(yǎng)7-10d后,神經(jīng)元特異性烯醇化酶(Neuron specific enolase, NSE)免疫組化染色方法鑒定神經(jīng)元的純度;用含連二亞硫酸鈉的無糖 Earle’s液模擬大腦缺血缺氧性損傷,建立缺氧缺糖神經(jīng)細(xì)胞損傷模型。分組:1、正常組;

2、2、模型組(缺氧缺糖神經(jīng)細(xì)胞損傷模型);3、EPO組(EPO組干預(yù)的缺氧缺糖神經(jīng)細(xì)胞損傷模型)。MTT檢測細(xì)胞存活率、FITC-Annexin V/PI熒光染色方法檢測細(xì)胞凋亡率、測定LDH漏出率,觀察EPO對缺氧缺糖損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用。
　　結(jié)果:1、成功原代培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞,經(jīng) NSE免疫組化方法鑒定神經(jīng)元純度大于90％;2、建立缺氧缺糖神經(jīng)細(xì)胞損傷模型,模型組中神經(jīng)細(xì)胞凋亡率為(15.2±0.37),LDH漏出率為(20.4±