Bax抑制肽對(duì)缺氧缺血腦損傷新生鼠抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用.pdf

1、目的:通過檢測(cè)腦組織內(nèi)凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目及caspase-3蛋白量，探討B(tài)ax抑制肽對(duì)缺氧缺血腦損傷新生鼠抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用及有效治療時(shí)間窗。
　　 方法:選取7日齡Wister新生大鼠182只做為研究對(duì)象，隨機(jī)分為假手術(shù)組(n=14)、對(duì)照組(n=84)和實(shí)驗(yàn)組(n=84)。對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組通過結(jié)扎左側(cè)頸總動(dòng)脈以及置于8％的氮氧混合氣中2小時(shí)建立缺氧缺血性腦損傷(hypoxia-ischemicbrain damage，H

2、IBD)模型，假手術(shù)組僅游離左側(cè)頸總動(dòng)脈，不結(jié)扎不低氧處理。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組分別經(jīng)左側(cè)側(cè)腦室注射5ug Bax-抑制肽(5ul)和生理鹽水(5ul)。根據(jù)HIBD模型建立后注射Bax抑制肽和生理鹽水的時(shí)間不同，將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組分為0h、6h、12h、24h、48h、72h六個(gè)亞組(n=14)。假手術(shù)組不注射任何藥物。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均于HIBD模型建立后7天處死，進(jìn)行腦組織病理檢測(cè)、TUNEL法檢測(cè)凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目、蛋白免疫印跡法檢測(cè)Ca

3、spase-3蛋白含量。
　　 結(jié)果:①左側(cè)海馬區(qū)腦組織HE染色:與假手術(shù)組比較，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組腦組織病理損傷明顯。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組在0h、6h、12h、24h、48h亞組比較，病理損傷程度較輕，在72h亞組比較無明顯差異。②TUNEL染色左側(cè)海馬區(qū)腦組織凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目:實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組在0h、6h、12h、24h、48h各亞組比較，凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在72h亞組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。實(shí)驗(yàn)組的各亞組之

4、間依次比較，HIBD模型后越早注射Bax抑制肽，凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目越少，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③蛋白免疫印跡法檢測(cè)左側(cè)海馬區(qū)腦組織caspase-3蛋白含量:實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組在0h、6h、12h、24h、48h各亞組比較，caspase-3含量明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在72h亞組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。實(shí)驗(yàn)組各亞組之間依次比較，HIBD模型后越早注射Bax抑制肽，腦組織內(nèi)caspase-3含量越少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論:①