骨髓基質(zhì)細(xì)胞與缺氧缺糖-復(fù)氧星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)的研究.pdf

1、目錄縮略詞表l中文摘要2英文摘要4請(qǐng)f‘言6日U舌材料和方法8結(jié)果20討論24結(jié)論29論文圖片30參考文獻(xiàn)36綜述4l攻讀碩士學(xué)位期問發(fā)表學(xué)術(shù)論文題目52臨床培訓(xùn)小結(jié)53致謝55論文聲明56論文審閱認(rèn)定書57徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文骨髓基質(zhì)細(xì)胞與缺氧缺糖／復(fù)氧星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)的研究中文摘要目的體外模擬星形膠質(zhì)細(xì)胞(AstrocytecellsAC)腦缺血損傷模型，觀察骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BoneMarrowstromalcellBMSCs)對(duì)

2、缺氧缺糖／復(fù)氧后星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響和凋亡信通路中Bcl2／Bax蛋白表達(dá)的變化。探討骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療腦缺血損傷的可能機(jī)制。方法體外培養(yǎng)SD大鼠的BMSCs和新生鼠的AC，并純化擴(kuò)增，鑒定。采用三氣培養(yǎng)箱，將星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧缺糖8h后分別復(fù)氧24h、48h、72h成功建立星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧缺糖／復(fù)氧模型，采用Transwell共培養(yǎng)體系，將BMSCs和缺氧缺糖星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)24h、48h、72h，體外建立腦缺血后BMSCs與AC共培

3、養(yǎng)模型。實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組(N組)、缺氧缺糖／復(fù)氧組(H／R組)、共培養(yǎng)組(C組)。觀察BMSCs對(duì)缺氧缺糖／復(fù)氧后星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響和凋亡信號(hào)通路中Bcl2／Bax蛋白表達(dá)的變化。采用AnnexinVF1vrC檢測(cè)AC細(xì)胞的凋亡、Westernblot檢測(cè)Bcl2／Bax蛋白表達(dá)，SPSSl30統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果1成功的建立了大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞、新生鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞分離、純化、鑒定、擴(kuò)增及共培養(yǎng)的方法體系。2在體外采用Tran

4、swell共培養(yǎng)體系成功模擬了腦缺血性AC損傷模型。3共培養(yǎng)組與缺氧缺糖／復(fù)氧組比較各時(shí)間點(diǎn)AC的凋亡明顯減少(尸O05)。4共培養(yǎng)組(C組)Bcl2／Bax比值較對(duì)照組(N組)有所降低，但與H／R組比較，Bcl2／Bax比值明顯增高差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(薩O05)，而缺氧缺糖／復(fù)氧單獨(dú)培養(yǎng)組(H／R組)Bcl2／Bax比值較對(duì)照組(N組)明顯降低持差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義p005)。結(jié)論1缺氧缺糖／復(fù)氧后的星形膠質(zhì)細(xì)胞損害隨著時(shí)間延長(zhǎng)逐漸加重。2