黃芪甲苷對缺糖缺氧復(fù)糖復(fù)氧大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞的保護機制研究.pdf

1、目的：探討黃芪甲苷對缺糖缺氧復(fù)糖復(fù)氧SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞的保護作用及其作用機制。
　　方法：對SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞的原代培養(yǎng)及分離，用連二亞硫酸鈉建立SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧模型，黃芪甲苷對大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞的毒性實驗，黃芪甲苷對內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞缺糖缺氧損傷復(fù)供模型形態(tài)學(xué)影響，MTT法與LDH漏出率法檢測不同濃度黃芪甲苷預(yù)處理的SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞缺糖缺氧/

2、復(fù)糖復(fù)氧后的成活率，用SOD、MDA檢測試劑盒檢測不同濃度黃芪甲苷預(yù)處理的 SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧后 SOD、MDA的變化，AO/EB法檢測黃芪甲苷對缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧膠質(zhì)細胞凋亡的影響，用RT-PCR法檢測不同濃度黃芪甲苷預(yù)處理的SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧后細胞HIF-1α、Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表達的變化，用蛋白免疫印記法檢測不同濃度黃芪甲苷預(yù)處理的S

3、D大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧后細胞Bcl-2、Bax蛋白表達的變化。
　　結(jié)果：成功培養(yǎng)并分離了SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞，成功篩選了各細胞缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧模型的條件。黃芪甲苷預(yù)處理后缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧的 SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞成活率均提高。黃芪甲苷預(yù)處理后缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧的SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞SOD活力均增高，黃芪甲苷預(yù)處理后缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧的SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞

4、及膠質(zhì)細胞MDA含量均下降，AO/EB法檢測結(jié)果顯示黃芪甲苷可以抑制膠質(zhì)細胞凋亡。不同濃度黃芪甲苷預(yù)處理的SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧后細胞HIF-1α mRNA表達均增高，Bcl-2 mRNA表達均增高, Bax mRNA表達均下降，Caspase-3 mRNA表達均下降，不同濃度黃芪甲苷預(yù)處理的SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞及膠質(zhì)細胞缺糖缺氧/復(fù)糖復(fù)氧后細胞Bcl-2蛋白表達均增多，Bax蛋白表達均降低。