牙本質(zhì)通透性的測定及其應(yīng)用研究.pdf

1、近年來,隨著口腔醫(yī)學(xué)的發(fā)展,越來越多的新型牙科材料如脫敏劑、充填材料等出現(xiàn)并應(yīng)用于臨床。這些材料在臨床應(yīng)用前,要考慮對牙髓的刺激性,這與材料相接觸的牙本質(zhì)的通透性和材料本身的生物相容性有關(guān)。牙本質(zhì)的通透性過大時,就出現(xiàn)了牙本質(zhì)敏感癥。影響牙本質(zhì)通透性的因素眾多,體內(nèi)測定困難。因此本研究模擬體內(nèi)情況,采用體外灌注法測定牙本質(zhì)的通透性并探討其應(yīng)用,設(shè)計并實施了以下實驗:
　　目的:
　　體外比較不同測試條件及不同部位人牙本質(zhì)的通

2、透性,并通過牙本質(zhì)通透性的變化來評價脫敏材料的療效,同時將牙本質(zhì)的通透性運用到體外細胞毒性測定實驗中,研究牙本質(zhì)通透性對牙科材料細胞毒性的影響,為今后更好的選擇牙科修復(fù)材料提供實驗參考。
　　方法:
　　1.牙本質(zhì)通透性的體外測定
　　用低速鋸切取人離體下頜第三磨牙牙合側(cè)近髓、中間及頰側(cè)近髓、中間牙本質(zhì)片,表面經(jīng)過碳化硅水砂紙打磨,超聲清洗后測定各牙片基線通透值。經(jīng)酸蝕處理后,采用灌注法分別在不同液壓,不同滲透液體條件

3、下測定其通透值;并用金相顯微鏡觀察各部位牙本質(zhì)小管密度,分析通透值與牙本質(zhì)小管密度間的相關(guān)性。
　　2.脫敏材料對牙本質(zhì)通透性的影響
　　用低速鋸切取人離體下頜第三磨牙牙合側(cè)近髓牙本質(zhì)片60個,表面經(jīng)過碳化硅水砂紙打磨,超聲清洗,吹干表面水分。牙本質(zhì)片遠髓面用350g/L磷酸處理30s,處理后所有試樣隨機分為三組,用體外灌注法測定三組牙本質(zhì)片基線通透值。三種脫敏材料:極固寧、Gluma和舒適達修復(fù)牙膏,分別測定脫敏材料使用后

4、的通透值,并用SEM觀察牙本質(zhì)表面形貌。
　　3.牙本質(zhì)通透性在牙科充填材料體外細胞毒性測定中的應(yīng)用
　　選取前期試驗中通透值相近的頰側(cè)近髓牙本質(zhì)片,96孔濾膜滲透板片切為每條含有8個孔(嵌入井)的濾膜滲透裝置,去除濾膜后以頰側(cè)近髓牙本質(zhì)片代替,用醫(yī)用生物膠將牙本質(zhì)片緊密粘固在嵌入井底,將含有牙本質(zhì)片的嵌入井置入96孔板內(nèi),制備以牙本質(zhì)為屏障的體外細胞培養(yǎng)裝置。常用的5種牙科充填材料按要求制備為10mm×10mm×1mm的試

5、樣塊,將試樣浸入含100ml/LFBS的RPMI1640培養(yǎng)液內(nèi)(液量與試樣表面積之比為10ml/cm2),37℃靜置24h后,取每種材料浸提液稀釋為50％濃度。采用浸提液法和牙本質(zhì)屏障法對5種牙科材料進行細胞毒性測定,并通過細胞形態(tài)觀察及細胞活性檢測評價實驗結(jié)果。
　　結(jié)果:
　　1.牙本質(zhì)表面經(jīng)酸蝕處理后,其通透值均顯著大于未酸蝕的對照組(P<0.05),其中酸蝕30s的通透值增加最顯著,與酸蝕60s的牙本質(zhì)相比差異亦有

6、統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。100cm液壓測定的通透值明顯大于32cm液壓(P<0.05);稀釋牛血清測得的通透值明顯小于蒸餾水和生理鹽水(P<0.05),蒸餾水與生理鹽水相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);牙合側(cè)牙本質(zhì)通透值明顯大于頰側(cè),近髓牙本質(zhì)通透值明顯大于中間(P<0.05);牙本質(zhì)通透值與其小管密度呈顯著正性相關(guān)(P<0.05)。
　　2.三種脫敏材料使用后牙本質(zhì)通透值均顯著低于使用前(P<0.05),通透值由低到高依次為

7、:極固寧≈Gluma<舒適達專業(yè)修復(fù)牙膏(P<0.05)。SEM觀察到,三種脫敏材料均可不同程度的堵塞牙本質(zhì)小管,降低牙本質(zhì)的通透值。
　　3.浸提液法結(jié)果為:高濃度氧化鋅丁香油水門汀浸提液組,細胞密度減少、形態(tài)異常,幾乎全部萎縮呈圓形;低濃度氧化鋅丁香油水門汀浸提液組,可見少許細胞呈梭形,但細胞伸展較差。牙本質(zhì)屏障法中氧化鋅丁香油水門汀組,大部分細胞呈不規(guī)則三角形或梭形,有少許細胞形態(tài)異常。相同濃度浸提液組,各組材料細胞毒性由底

8、到高順序均為:氫氧化鈣水門汀≈玻璃離子水門汀<復(fù)合樹脂<磷酸鋅水門汀<氧化鋅丁香油水門汀(P<0.05)。牙本質(zhì)屏障法中,各組材料細胞毒性由底到高順序為:氫氧化鈣水門汀≈玻璃離子水門汀<氧化鋅丁香油水門汀<復(fù)合樹脂<磷酸鋅水門汀(P<0.05)。牙本質(zhì)屏障法得到5種材料的細胞增殖率均高于浸提液法,其中氧化鋅丁香油水門汀組尤為顯著,為(89.1±3.6)%,等級評分顯示用浸提液法測得氧化鋅丁香油水門汀組細胞毒性呈重度,而用牙本質(zhì)屏障法測得

9、細胞毒性呈輕度。
　　結(jié)論:
　　1.牙本質(zhì)表面用350g/L磷酸酸蝕30s,可以去除玷污層,且不會明顯擴大牙本質(zhì)小管。不同部位牙本質(zhì)的通透性不同,牙合側(cè)牙本質(zhì)通透性大于頰側(cè),近髓牙本質(zhì)通透性大于中間,且牙本質(zhì)的通透性與其小管密度密切相關(guān)。測試液體影響牙本質(zhì)的通透性。
　　2.三種脫敏材料均可不同程度的堵塞牙本質(zhì)小管,有效降低牙本質(zhì)的通透值,其中以極固寧和Gluma降低通透值效果最好。SEM觀察材料堵塞牙本質(zhì)小管的方法