脂多糖、鈣-鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶Ⅱ抑制劑預處理對TNBS誘導BALB-C小鼠結腸炎癥的影響.pdf

1、目的：
　　 探討脂多糖、鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶Ⅱ抑制劑KN62預處理對三硝基苯磺酸(TNBS)誘導的小鼠炎癥性腸病的影響，并對結腸組織內(nèi)IL-6mRNA及MHC-Ⅱ類分子的活性表達水平進行檢測。
　　 方法：
　　 將禁食24小時、不禁飲的40只BALB/C雌性小鼠隨機分為四組，每組10只：分別為正常對照組(NC組)、模型對照組(UC組)、脂多糖組(LPS組)、鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶抑制劑組(KN62組)。

2、LPS組、KN62組、UC組小鼠分別預先腹腔注射LPS溶液(5mg/kg)、KN62溶液(25ng/小鼠)、生理鹽水，2小時后再予100mg/kg2，4，6-三硝基苯磺酸乙醇溶液(總體積100μl)灌腸；NC組予等體積生理鹽水結腸灌注。于造模后第7天處死小鼠，觀察指標包括：疾病活動指數(shù)(DAI)，結腸粘膜病理組織學損傷評估(HI)，RT-PCR法檢測各組結腸粘膜中IL-6mRNA表達的水平，流式細胞儀檢測結腸固有層單個核細胞MHC-Ⅱ類

3、分子活性的表達水平。
　　 結果：
　　 造模第7天，模型對照組(UC)的DAI、結腸粘膜病理組織學評分明顯高于正常對照組(NC組)(8.75±0.91vs0；10.92±0.93vs1.80±0.58，均p<0.05)，差異有統(tǒng)計學意義；LPS組DAI、結腸粘膜病理組織學評分高于UC組(10.68±1.16 vs8.75±0.91；13.54±1.12vs10.92±0.93，均P<0.05)，差異有統(tǒng)計學意義；KN6

4、2組的DAI、結腸粘膜病理組織學評分低于UC組(4.36±0.52vs8.75±0.91；5.47±0.81vs10.92±0.93，均P<0.05)，差異有統(tǒng)計學意義；UC組結腸粘膜的IL-6mRNA及MHC-Ⅱ類分子活性的表達都高于NC組(0.53±0.21vs0.14±0.12；4.97±0.23 vs1.26±0.11，均p<0.05)，差異有統(tǒng)計學意義；各項檢測指標在LPS組高于UC組(0.71±0.25vs0.53±0.21

5、；7.32±0.14 vs4.97±0.23，均p<0.05)；KN62組低于UC組(0.38±0.13 vs0.53±0.21；2.38±0.16 vs4.97±0.23，均P<0.05)，差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結論：
　　 1.比較模型對照組小鼠和正常對照組小鼠疾病活動度指數(shù)、結腸粘膜病理組織學損傷評估、IL-6mRNA及MHC-Ⅱ類分子活性的表達等指標，提示予5％TNBS乙醇溶液(100mg/kg)灌腸能夠誘導

6、出實驗性結腸炎動物模型。
　　 2采用較大劑量脂多糖(LPS)干預后，該模型組小鼠結腸粘膜中IL-6的表達和結腸粘膜固有層單核細胞中MHC-Ⅱ類分子活性的表達明顯增加，臨床癥狀加重，病理組織學表現(xiàn)顯著惡化，提示脂多糖可明顯增強組織細胞IL-6的轉(zhuǎn)錄水平，進而加重實驗性小鼠結腸炎癥反應。
　　 3采用鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶抑制劑(KN62)干預后，該模型組小鼠結腸粘膜中IL-6的表達下調(diào)，結腸粘膜固有層單核細胞中MHC-