MG63和MG63-ADR骨肉瘤裸鼠模型的建立及VEGF和NF-κB1基因在骨肉瘤裸鼠模型中表達的意義研究.pdf

1、骨肉瘤是青少年最常見的骨原發(fā)惡性腫瘤,雖然保肢手術(shù)和新輔助化療方案的實施使骨肉瘤的預(yù)后有很大的提高,但是相當(dāng)一部分患者因多藥耐藥而預(yù)后不良,因此迫切需要對骨肉瘤耐藥機制進行更深入的研究。前期工作中我們應(yīng)用基因芯片技術(shù)檢測到VEGF和NF-κB1基因可能與骨肉瘤耐藥相關(guān),本次課題我們建立骨肉瘤動物模型并將圍繞這兩個基因,通過免疫組化和RT-PCR技術(shù)進一步驗證VEGF和NF-κB1基因在骨肉瘤MG63耐藥細胞株和親本細胞株的表達情況,為進

2、一步探討骨肉瘤的耐藥機制和尋求更有效的治療靶點提供實驗依據(jù)。
　　 第一章 MG63和MG63／ADR骨肉瘤裸鼠模型的建立
　　 目的:建立MG63和MG63／ADR骨肉瘤裸鼠模型。
　　 方法:采用阿霉素濃度遞增培養(yǎng)法,建立人骨肉瘤MG63的多藥耐細胞株MG63／ADR。BALB／C裸鼠隨機分為兩組,分別將MG63和MG63／ADR細胞采用皮下接種法注入裸鼠的一側(cè)腋部皮下建立骨肉瘤裸鼠模型。
　　 結(jié)果

3、:與MG63細胞比較,MG63／ADR細胞G0／G1期細胞減少10.61％,S期細胞增加15.06％。該細胞株對多種抗腫瘤藥物耐藥,MG63／ADR對阿霉素的耐藥指數(shù)是親本細胞的9.09倍,對順鉑(DDP)、甲氨蝶呤(MTX)、表阿霉素(EPB)、長春新堿(VCR)四種藥物耐藥指數(shù)均顯著增加。接種MG63和MG63／ADR細胞后,裸鼠均于1周左右成瘤,兩組在接種部位均有腫瘤生長,成瘤率100％。
　　 結(jié)論:成功建立MG63和M

4、G63／ADR骨肉瘤裸鼠模型,為進一步開展骨肉瘤耐藥相關(guān)研究提供了實驗?zāi)Ｐ汀?br>　　 第二章 VEGF和NK-κB1基因在骨肉瘤裸鼠模型中的表達及其意義
　　 目的:檢測MG63和MG63／ADR骨肉瘤裸鼠模型中VEGF和NF-κB1基因表達的差異及其意義。
　　 方法:建立MG63和MG63／ADR骨肉瘤裸鼠模型后,第6周處死裸鼠,采用免疫組織化學(xué)及RT-PCR的方法檢測兩組瘤灶中VEGF和NF-κB1基因表達的