核苷(酸)類似物相關(guān)HBV P基因區(qū)耐藥變異的焦磷酸測(cè)序及分析.pdf

1、背景與目的：慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)治療的關(guān)鍵是抗病毒治療。目前被我國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局(State Food and Drug Administration,SFDA)批準(zhǔn)用于抗病毒治療的藥物主要包括兩類:干擾素(interferon,IFN)類與核苷(酸)類似物[nucleos(t)ide analogues,NA],后者包括拉米夫定(lamivudine,LAM)、阿德福韋酯(adefov

2、ir dipivoxil,ADV)、恩替卡韋(entecavir,ETV)與替比夫定(telbivudine,LdT)。NA對(duì)乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)具有明顯的抑制作用；但隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng),其HBV可能發(fā)生NA相關(guān)耐藥變異,相繼出現(xiàn)病毒學(xué)突破、生化學(xué)突破、肝炎發(fā)作與肝功能失代償?shù)?。因此定期監(jiān)測(cè)耐藥、早期發(fā)現(xiàn)耐藥相關(guān)變異并給予有效的挽救治療對(duì)于治療成功具有重要意義。
　　 焦磷酸測(cè)序法作為一種新

3、興的基因測(cè)序方法,已有報(bào)道用于LAM耐藥檢測(cè),與直接測(cè)序法的符合率高,且當(dāng)變異病毒株達(dá)5％～10％時(shí)即可檢出。本研究的目的是分析HBV P基因區(qū)核苷(酸)類似物相關(guān)10個(gè)位點(diǎn)的變異情況,為臨床合理選擇抗病毒藥物提供參考。
　　 材料和方法:采用焦磷酸測(cè)序法對(duì)核苷(酸)類似物治療并發(fā)生病毒學(xué)突破或不充分病毒學(xué)應(yīng)答的75例CHB患者HBV P基因區(qū)10個(gè)位點(diǎn)(rtIl69T、rtVl73L、rtL180M、rtA181V/T、rtT

4、184G、rtA194T、rtS202I、rtM204V/I、rtN236T、M205V)進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)IAM耐藥時(shí)5種常見(jiàn)突變模式間HBV-DNA水平及ADV耐藥時(shí)不同突變模式間HBV-DNA水平進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果:①LAM相關(guān)耐藥48例,發(fā)現(xiàn)4個(gè)耐藥位點(diǎn)呈8種模式,以rtM204為主；ADV10例,2個(gè)耐藥位點(diǎn)呈4種模式,以rtA181為主；ETV6例,7個(gè)耐藥位點(diǎn)呈4種模式,以rtT184多見(jiàn)；LdT4例,2個(gè)耐藥位點(diǎn)呈

5、2種模式,均存在rtM2041。②5種常見(jiàn)LAM不同耐藥變異模式間HBV-DNA水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1.013,P=-0.413)；而ADV不同突變模式間HBV-DNA水平的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.519,P=0.023),且rtA181V+N236T聯(lián)合變異組高于單一rtA181V位點(diǎn)變異組(P=0.01)。
　　 結(jié)論:①應(yīng)用NA可篩選出HBV P基因區(qū)的相關(guān)耐藥變異,病毒突破患者應(yīng)進(jìn)行耐藥變異的檢測(cè)并行個(gè)體化治療。