博萊霉素致肺纖維化大鼠模型與肺氣虛證相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　通過(guò)觀測(cè)大鼠一般情況、肺組織病理學(xué)（HE染色、MASSON染色）、免疫學(xué)指標(biāo)（Ig-G、IL-4、IFN-γ）以及補(bǔ)肺湯對(duì)以上指標(biāo)的干預(yù)作用，來(lái)評(píng)價(jià)構(gòu)建以博萊霉素致肺纖維化作為病理基礎(chǔ)的肺氣虛大鼠模型的可行性，以深入研究中醫(yī)肺氣虛的本質(zhì)，指導(dǎo)肺纖維化臨床治療。
　　方法：
　　復(fù)制BLMA5致大鼠肺間質(zhì)纖維化的模型，即大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉45mg/kg體質(zhì)量麻醉后，氣管內(nèi)給予BLMA5（按5mg/kg體質(zhì)

2、量給藥）。96只SD健康大鼠，隨機(jī)分為四組：空白組、模型組、強(qiáng)的松組、補(bǔ)肺湯組。空白組和模型組于造模后每天給予生理鹽水(1ml/100g)灌胃；補(bǔ)肺湯組和強(qiáng)的松組分別給予補(bǔ)肺湯流浸膏(2.1g/200g)及強(qiáng)的松片與生理鹽水混合制劑(6.3mg/kg)灌胃。各組分別于第7d，14d，28d各處死8只大鼠，定期觀測(cè)動(dòng)物一般表現(xiàn)癥狀并記錄體質(zhì)量變化，依次收集大鼠血清和肺組織。通過(guò)病理切片HE染色觀察肺泡炎分度、MASSON染色觀察肺纖維化分

3、級(jí)來(lái)評(píng)價(jià)肺纖維化模型；通過(guò)觀測(cè)大鼠一般情況變化和用ELISA法測(cè)定血清中INF-γ、IL-4、IgG含量的變化來(lái)評(píng)價(jià)肺氣虛證模型；另外通過(guò)觀測(cè)補(bǔ)肺湯對(duì)于該模型的干預(yù)作用進(jìn)一步證實(shí)該模型的可行性，以及其對(duì)博萊霉素所致肺纖維化大鼠的治療效果和可能的作用機(jī)理。
　　結(jié)果：
　　1、各造模組早期肺組織均以巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞為主的大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，后期為少量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肺組織結(jié)構(gòu)破壞，肺泡腔明顯縮小，肺間質(zhì)被膠原纖維和成纖維細(xì)胞替

4、代，肺間質(zhì)纖維化形成；而補(bǔ)肺湯組和強(qiáng)的松組大鼠的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和成纖維細(xì)胞的增生程度要低于模型組，表明補(bǔ)肺湯組和強(qiáng)的松組大鼠肺泡炎和肺纖維化程度較輕。
　　2、模型組大鼠與正常組大鼠比較，呼吸急促，心率加快，精神疲憊，活動(dòng)量減少，行動(dòng)遲緩，食量減少，體質(zhì)量增幅減輕，與中醫(yī)氣虛的證候特點(diǎn)符合。
　　3、正常組相比，模型組大鼠血清IgG表達(dá)在各時(shí)期顯著降低（P＜0.01）；強(qiáng)的松組大鼠各個(gè)時(shí)期血清IgG表達(dá)與正常組相比顯著降低（P

5、＜0.01）。與模型組相比，補(bǔ)肺湯組大鼠在各個(gè)時(shí)期的血清 IgG表達(dá)要顯著高于前者（P＜0.05）。
　　4、與正常組比較,模型組大鼠血清中IL-4的表達(dá)在各個(gè)時(shí)期明顯增高，而IFN-γ的表達(dá)在各時(shí)期明顯下調(diào)趨勢(shì)，同時(shí)IFN-γ/IL-4比值在各時(shí)期明顯下降，其差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；補(bǔ)肺湯組大鼠血清中IL-4的表達(dá)在第7天時(shí)顯著升高（P＜0.05）。與模型組比較，補(bǔ)肺湯組、強(qiáng)的松組大鼠血清IFN-γ在各個(gè)時(shí)期的表達(dá)

6、明顯增高（P＜0.05）；強(qiáng)的松組大鼠血清中IL-4的表達(dá)在各個(gè)時(shí)期的表達(dá)顯著降低（P＜0.05）；而補(bǔ)肺湯組血清中IL-4的表達(dá)在第28天顯著降低（P＜0.05），但在第7、14天無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　1、本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M的肺組織大體標(biāo)本和病理特征改變與文獻(xiàn)報(bào)道一致，說(shuō)明肺纖維化大鼠模型造模成功。
　　2、通過(guò)觀測(cè)博萊霉素致肺纖維化大鼠模型存在中醫(yī)肺氣虛證的癥狀表現(xiàn)和相關(guān)免疫學(xué)指標(biāo)的改變，說(shuō)明以肺纖維化為病理基

7、礎(chǔ)構(gòu)建肺氣虛模型是可行的。
　　3、通過(guò)補(bǔ)氣的經(jīng)典方劑補(bǔ)肺湯來(lái)干預(yù)大鼠肺纖維化的形成取得較好的實(shí)驗(yàn)效果，進(jìn)一步證實(shí)了博萊霉素致肺纖維化大鼠模型中存在著中醫(yī)肺氣虛證。
　　4、補(bǔ)肺湯對(duì)肺泡炎的發(fā)生、發(fā)展及肺纖維化的形成有較好的預(yù)防和治療作用，能延緩肺纖維化的進(jìn)程，其機(jī)制可能是：增加肺纖維化大鼠血清中IgG的含量，從而改善肺纖維化大鼠的免疫功能；促進(jìn)血清中IFN-γ的分泌，抑制IL-4的分泌，從而調(diào)節(jié)了Th1/Th2細(xì)胞因子失衡