KLF5對正常和腫瘤上皮細胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化抑制作用的研究.pdf

1、KLF5（Krüppel-like factor5）作為一個基礎轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控著很多生理和病理過程。一些研究KLF5生物學功能的文獻或是生物信息學的分析雖然暗示了KLF5和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)這一重要的細胞生物學過程密切相關，但是，KLF5能否直接調(diào)節(jié)EMT，如何調(diào)控EMT，怎樣關聯(lián)于現(xiàn)有的EMT信號通路，以及是否在腫瘤EMT及其相關過程中發(fā)揮作用等很多重要的科學問題尚待回答。在本研究中，我們圍繞正常和腫瘤上皮細胞中KLF5是否以及如

2、何調(diào)控上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的核心針對以上問題進行了逐一探索。首先，用TGF-β和EGF聯(lián)合誘導正常上皮細胞發(fā)生EMT，或是用TGF-β在前列腺腫瘤上皮細胞中誘導EMT都造成了KLF5表達的下調(diào)。而不論是在正常上皮細胞還是腫瘤上皮細胞中敲減KLF5都能破壞上皮表型誘導EMT，主要體現(xiàn)在細胞形態(tài)變長，遷移（和浸潤）的能力增強，表征上皮狀態(tài)的分子標志物如E-cadherin和ZO-1表達下調(diào)而表征間質(zhì)狀態(tài)的分子標志物如FN1和Vimentin等表達上

3、調(diào)，以及E-cadherin和肌動蛋白纖維膜定位的改變。從機制上講，我們根據(jù)芯片篩選，用生物化學的手段鑒定了KLF5可以通過結(jié)合在miR-200啟動區(qū)的GC盒上激活miR-200表達。并且在功能上，miR-200的過表達可以恢復無論是KLF5敲減還是TGF-β和EGF誘導帶來EMT。而過表達KLF5也可以恢復無論是正常上皮細胞還是腫瘤上皮細胞中誘導的EMT。在前列腺癌中，KLF5影響與EMT密切相關的腫瘤干性。DU145細胞的裸鼠成瘤實

4、驗提供了KLF5在前列腺癌中抑制EMT抑制腫瘤干性的進一步證據(jù)。PB-Cre介導的Pten和Klf5雙敲小鼠中的結(jié)果，為敲除Klf5減少miR-200表達促進EMT提供了體內(nèi)證據(jù)?；颊呷橄俨±順颖局袑LF5和miR-200表達進行的相關性分析為KLF5-miR-200軸的存在提供了人源樣本的證據(jù)?？偠灾?，在正常和腫瘤上皮中，KLF5通過轉(zhuǎn)錄激活miR-200家族表達維持上皮表型抑制誘導的EMT過程，為上皮細胞響應TGF-β信號發(fā)生E