革蘭陰性桿菌的耐藥機(jī)制和分子流行病學(xué)研究.pdf

1、目的：研究從我院住院患者、醫(yī)院環(huán)境以及醫(yī)務(wù)人員手分離的耐藥革蘭陰性桿菌的分布情況，耐藥特征和耐藥機(jī)制；醫(yī)院不同對象分離的耐藥細(xì)菌的同源性，探討耐藥細(xì)菌的傳播機(jī)制及其與醫(yī)院環(huán)境和醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生的關(guān)系。 方法：收集自臨床送檢標(biāo)本的耐藥革蘭陰性桿菌146株，同時(shí)在ICU病房采樣收集醫(yī)院環(huán)境及醫(yī)護(hù)人員手部的革蘭陰性桿菌，進(jìn)行常規(guī)分離鑒定，K-B紙片法進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)；采用表型篩選法檢測超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的產(chǎn)酶率，分別用TE

2、M、SHV和CTX-M型引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增檢測基因類型；雙紙片擴(kuò)大及協(xié)同實(shí)驗(yàn)進(jìn)行金屬β-內(nèi)酰胺酶的表型初篩，采用IMP和VIM型引物對表型陽性菌株進(jìn)行PCR擴(kuò)增，DNA測序并進(jìn)行同源性比較確定基因類型；采用質(zhì)粒指紋圖譜及ERIC-PCR對從醫(yī)院不同對象分離的同類型耐藥革蘭陰性桿菌進(jìn)行同源性分析。 結(jié)果：1．146株革蘭陰性桿菌中腸桿菌科細(xì)菌和非發(fā)酵細(xì)菌分別占65.1％(95／146)和34.9％(51／146)，其中39.7％(

3、58／146)分離自各ICU病房；22株環(huán)境病原菌標(biāo)本主要為不動桿菌屬，占86.4％：168株革蘭陰性桿菌對多種抗菌藥物耐藥。2. 168株革蘭陰性桿菌中共檢出ESBLs菌57株，總檢出率為33.9％；產(chǎn)ESBLs菌株比非產(chǎn)ESBLs菌株的耐藥性顯著提高；PCR檢測30株(52.6％)攜帶TEM基因，18株(31.6％)攜帶SHV基因，20株(35.1％)攜帶CTX-M基因，還存在同一菌株的多基因攜帶情況。3．耐頭孢他啶或／和亞胺培南

4、的非發(fā)酵革蘭陰性桿菌52株，檢測出7株MBL陽性株，PCR檢測出一株產(chǎn)VIM-2型金屬酶的銅綠假單胞菌。4．從臨床和環(huán)境分離的肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌、部分不動桿菌屬經(jīng)質(zhì)粒指紋圖譜及ERIC-PCR基因檢測均存在同源性，且神經(jīng)外科存在耐藥陰溝腸桿菌的爆發(fā)流行。 結(jié)論：1．我院臨床和ICU環(huán)境分離的革蘭陰性桿菌具有明顯的耐藥性，大部分為多重耐藥菌。2．革蘭陰性桿菌中檢出ESBLs陽性菌株57株(33.9％)；ESBLs陽性菌比ES