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1、目的:探討汽油廢氣顆粒(diesel exhaust particle,DEP)吸入對(duì)小鼠哮喘樣變化的影響。 方法:C57BL/6雄性小鼠,隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。對(duì)照組吸入生理鹽水4w,實(shí)驗(yàn)組為吸入DEP1w組、2w組、3w組和4w組。通過氣道誘發(fā)試驗(yàn)測(cè)定小鼠氣道阻力,求出Penh-2(enhanced pause-2,Penh-2)值,觀察氣道反應(yīng)性變化;收集支氣管肺泡灌洗液(bronchialveolar lavage f
2、luid,BALF),BALF中的細(xì)胞吉姆薩染色后進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù);肺組織病理切片經(jīng)HE和Masson-trichrome染色后觀察病理學(xué)變化;利用ELISA測(cè)定小鼠血清總IgE水平;利用RT-PCR方法觀察肺組織中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4、IL-5的表達(dá)。 結(jié)果:在對(duì)照組沒有發(fā)生氣道高反應(yīng)性,小鼠吸入DEP后,發(fā)生了氣道高反應(yīng)性(airway hyperresponsiveness,AHR),且氣道高反應(yīng)性與DEP吸入時(shí)間
3、有相關(guān)性(r=-0.941,P<0.01);在BALF中,對(duì)照組大部分以巨噬細(xì)胞為主,DEP吸入1 w組出現(xiàn)大量的上皮細(xì)胞,從DEP吸入2 w組開始出現(xiàn)不同程度的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),其中淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),DEP吸入4 w組出現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤(rùn),與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);肺組織病理切片觀察到隨著DEP吸入,出現(xiàn)不同程度的上皮細(xì)胞脫落,肺泡壁破壞,氣道周圍炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及基底膜纖維化等病理改變;
4、DEP吸入3 w組、4 w組血清總IgE水平增高,與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01): RT-PCR結(jié)果,隨著DEP吸入時(shí)間的延長(zhǎng),IFN-γ表達(dá)逐漸減少,DEP吸入4 w組幾乎無表達(dá),IL-4在對(duì)照組沒有表達(dá),從DEP吸入1 W組開始就有表達(dá),IL-5的表達(dá)隨著DEP吸入時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增多。 結(jié)論:正常小鼠吸入DEP后發(fā)生了氣道高反應(yīng)性、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、血清總IgE水平增高、IL-4和IL-5細(xì)胞因子表達(dá)增強(qiáng)、IFN-γ表
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