硫酸氨基胍對兔蛛網(wǎng)膜下腔出血后遲發(fā)型腦血管痙攣的影響研究.pdf

1、目的：研究硫酸氨基胍對兔蛛網(wǎng)膜下腔出血后遲發(fā)型腦血管痙攣的影響及其作用機制。
　　 方法：采用一側頸總動脈結扎+枕大池二次注血法制備蛛網(wǎng)膜下腔出血動物模型，選用健康成年家兔72只隨機分為假手術對照組(A組)、SAH組(B組)、氨基胍靜脈干預組(C組)、氨基胍蛛網(wǎng)膜下腔干預組(D組)4組，每組再根據(jù)時間點不同隨機分為3個亞組，每個亞組6只家兔。A組動物僅進行相應手術操作，不進行蛛網(wǎng)膜下腔注血，標準飼養(yǎng)條件下飼養(yǎng)24h、72h、7d

2、；B組動物進行兩次蛛網(wǎng)膜下腔注血后標準條件下飼養(yǎng)24h、72h、7d；C組動物在SAH模型制作成功后分別飼養(yǎng)24h、72h、7d，期間予硫酸氨基胍靜脈給藥干預；D組動物在SAH模型制作成功后再分別飼養(yǎng)24h、72h、7d，期間予硫酸氨基胍蛛網(wǎng)膜下腔給藥干預。各組動物分別在24h、72h、7d三個時間點斷頭取腦，取基底動脈行H-E染色及iNOS免疫組化染色，觀察基底動脈血管變化及內(nèi)皮細胞iNOS表達，同時取海馬組織行眥染色及Bcl-2、B

3、ax免疫組化染色，觀察神經(jīng)元密度及Bax和Bcl-2的表達，期間每天進行一次神經(jīng)生物學評分，采用SPSS統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行進行統(tǒng)計學分析。
　　 結果：H-E染色切片觀察：①基底動脈：A組基底動脈血管內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞排列整齊，結構正常，動脈壁光滑無增厚；B組血管內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞變性腫脹，排列紊亂，血管管徑較A組明顯變細，管壁增厚；C、D組血管內(nèi)皮細胞腫脹不明顯，管壁無增厚，管徑縮小較B組輕。②海馬CA1區(qū)：A組神經(jīng)元

4、細胞排列整齊，細胞核大而圓，核仁清晰，偶見凋亡細胞，組內(nèi)各時間點神經(jīng)元密度差異不大，其余三組均見不同程度的神經(jīng)元凋亡；B組可見神經(jīng)元數(shù)量明顯減少，神經(jīng)元固縮，細胞核顯示不清，大量錐體細胞凋亡；C、D兩組神經(jīng)元排列基本整齊，各時間點神經(jīng)元密度較B組高。免疫組化切片觀察：iNOS、Bcl-2和Bax陽性細胞主要表現(xiàn)為胞質(zhì)著色，內(nèi)見棕黃色顆粒。③iNOS陽性細胞觀察結果：在A組，iNOS陽性細胞在基底動脈內(nèi)皮中僅見少量表達，組內(nèi)各時間點比較差

5、異不大，在其余三組基底動脈內(nèi)皮細胞明顯表達；B組與C、D組相比，iNOS陽性細胞數(shù)表達多且較強，以72小時最強，C、D兩組未見此趨勢。④Bcl-2陽性細胞觀察結果：在A組，Bcl-2陽性細胞在海馬神經(jīng)元中有少量表達，組內(nèi)各時間點差異不大，其余三組海馬CA1區(qū)Bcl-2表達均較A組明顯；其中C、D組與B組相比，各時間點Bcl-2陽性細胞數(shù)多且表達強度強；B組Bcl-2的表達強度隨時間呈現(xiàn)先下降，后緩回升趨勢，C、D兩組這種趨勢不明顯。⑤B

6、ax陽性細胞觀察結果：在A組，Bax陽性細胞在海馬神經(jīng)元中有少量表達，組內(nèi)各時間點差異不大，其余三組海馬CA1區(qū)Bax表達明顯；B組與C、D組相比，Bax陽性細胞數(shù)多且表達強度強，在72小時表達強度最高，后下降，這種趨勢在C、D組不明顯。神經(jīng)功能評分觀察：A組：進食及飲水量基本正常，僅在兩次手術后有短暫的攝食量下降，無神經(jīng)功能障礙；B、C、D組每次蛛網(wǎng)膜下腔注血后均出現(xiàn)進食飲水量減少，轉伴不同程度的神經(jīng)功能障礙，以72小時-96小時最重

7、，B組癥狀及持續(xù)時間明顯重于C、D兩組，C、D兩組差異不大。
　　 結論：⑴手術切口損傷及結扎一側頸總動脈對兔基底動脈血管內(nèi)皮細胞iNOS及對側海馬組織中Bcl-2、Bax的表達無顯著影響。⑵SAH可使基底動脈內(nèi)皮細胞iNOS及海馬組織中Bcl-2、Bax的表達升高，Bcl-2/Bax值減小。⑶硫酸氨基胍(Ag)可能通過選擇性抑制誘導型一氧化氮合酶(iNOS)的過度表達、進而預防大量NO所介導的的氧化應激反及細胞毒性反應，從而起