創(chuàng)傷愈合中降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）對表皮干細(xì)胞遷移、趨化作用的研究.pdf

1、干細(xì)胞(stem cell，SC)研究開始于20世紀(jì)60年代，隨著生物實(shí)驗技術(shù)的發(fā)展，干細(xì)胞的研究取得了突破性進(jìn)展。近年來，人們已在體外分離純化、鑒別、擴(kuò)增和培養(yǎng)表皮干細(xì)胞.表皮干細(xì)胞研究對了解皮膚修復(fù)及皮膚癌發(fā)生機(jī)制有重要作用。表皮干細(xì)胞的研究已經(jīng)歷了20多年，目前仍處于實(shí)驗觀察階段，但已展示了良好的臨床應(yīng)用前景。 表皮干細(xì)胞標(biāo)志物 迄今為止，尚未見有表皮干細(xì)胞特異性的標(biāo)志物的研究報道。目前學(xué)術(shù)界比較認(rèn)可并應(yīng)用廣泛的是

2、BrdU、β1整合素和角蛋白19(K19)，其依據(jù)是表皮干細(xì)胞在形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為非成熟細(xì)胞特征、較強(qiáng)的自我更新能力及對β1整合素和角蛋白19(K19)的特異表達(dá)。因此，本實(shí)驗采用β1整合素、K19等多種干細(xì)胞表面標(biāo)記物結(jié)合BrdU標(biāo)記來鑒定表皮干細(xì)胞以求能得出更加準(zhǔn)確和客觀的結(jié)果。 神經(jīng)肽 既往的研究表明皮膚發(fā)育及創(chuàng)傷愈合過程中表皮干細(xì)胞和感覺神經(jīng)在分布的時間、空間上有密切關(guān)系.目前，已有實(shí)驗證明感覺神經(jīng)肽P物質(zhì)還可以促進(jìn)

3、表皮干細(xì)胞大量募集于創(chuàng)緣與肉芽組織中，從而加速傷口的愈合。降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)尚未見有促進(jìn)表皮干細(xì)胞聚集的研究報道。 研究目標(biāo) 探討創(chuàng)傷愈合中CGRP對表皮干細(xì)胞遷移、趨化作用的影響.驗證前人關(guān)于SP在創(chuàng)傷愈合中所起作用的研究結(jié)果，并比較CGRP和SP作用的異同。 方法： 將新生SD大鼠腹腔注射BrdU(BrdU為一種核標(biāo)記物，可作為表皮干細(xì)胞的示蹤劑)，正常飼養(yǎng)60天后，分為CGRP組、SP組、

4、辣椒素組和對照組，四組均致背部全層皮膚缺損,CGRP組和SP組致傷當(dāng)天開始創(chuàng)面給予CGRP和SP(1次/d)，辣椒素組致傷前l(fā)周皮下預(yù)注射辣椒素(capsaicin)，觀察四組創(chuàng)面愈合速度和表皮干細(xì)胞的遷移特征。 結(jié)果： CGRP組與SP組的創(chuàng)面愈合速度最快，創(chuàng)緣BrdU陽性細(xì)胞率最高，峰值出現(xiàn)最早；辣椒素組愈合速度最慢,BrdU陽性細(xì)胞率最低，峰值出現(xiàn)晚；CGRP組和SP組除創(chuàng)緣外，在創(chuàng)面肉芽組織中也出現(xiàn)了BrdU陽性