沙利度胺抑制卵巢癌細(xì)胞增殖及血管生成實驗研究.pdf

1、缺氧是實體腫瘤常見現(xiàn)象，腫瘤在缺氧狀態(tài)下，一方面通過擴(kuò)張血管、增加血流量來改善氧供，一方面則促進(jìn)新生血管的生成來獲得更多的氧氣。缺氧是介導(dǎo)血管生成，進(jìn)一步促使腫瘤生長、轉(zhuǎn)移的一個關(guān)鍵信號。目前已知沙利度胺通過抑制腫瘤細(xì)胞生長及血管生成作用達(dá)到抗腫瘤生長和轉(zhuǎn)移治療效果。但沙利度胺對卵巢癌抑制作用研究較少，本實驗?zāi)康氖茄芯可忱劝穼β殉舶┘?xì)胞生長及血管生成的抑制作用，探討其對卵巢癌的治療效果及其對腫瘤缺氧下VEGF的上游調(diào)控因子的作用。

2、 一、沙利度胺對缺氧下人卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖情況影響。 目的：模擬體內(nèi)腫瘤生長缺氧環(huán)境，觀察沙利度胺對不同缺氧時間下人卵巢癌SKOV3細(xì)胞的增殖情況影響，探討沙利度胺對人卵巢癌細(xì)胞SKOV3生長抑制作用。 方法：將處于對數(shù)生長期的SKOV3細(xì)胞分別給予不同濃度沙利度胺處理12小時后，再各自缺氧0小時、8小時、16小時、24小時，用MTT法檢測缺氧對細(xì)胞增殖的影響。 結(jié)果：24小時內(nèi)的缺氧，卵巢癌細(xì)胞增殖基

3、本不受影響(P<0.05)；各缺氧組中不同濃度沙利度胺可以顯著抑制卵巢癌細(xì)胞增殖(P<0.05)，這種抑制作用隨缺氧時間的延長、給藥濃度的增加而增強(qiáng)(P<0.05)。 結(jié)論：沙利度胺可以顯著抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖，且呈時間、濃度效應(yīng)關(guān)系。 二、沙利度胺抑制人卵巢癌SKOV3細(xì)胞血管生成表達(dá)作用及機(jī)制。 1.缺氧誘導(dǎo)下人卵巢癌SKOV3細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)及機(jī)制。 目的：研究缺氧對體外培養(yǎng)人卵巢癌SKO

4、V3細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的影響及機(jī)制。 方法：建立SKOV3細(xì)胞體外缺氧培養(yǎng)模型，經(jīng)不同時間缺氧處理后(8h、16h、24h)，使用免疫熒光染色半定量分析缺氧下SKOV3細(xì)胞HIF-1α及VEGF蛋白表達(dá)情況。 結(jié)果：免疫熒光半定量證實缺氧后HIF-1α蛋白與VEGF蛋白表達(dá)相對常氧條件下差異有顯著性(P<0.05)，HIF-1α蛋白常氧下表達(dá)少，缺氧8小時即顯著增加，且隨缺氧時間的增加呈時間效應(yīng)關(guān)系(P<0.05)

5、，VEGF 蛋白常氧下即有表達(dá)，缺氧后表達(dá)增加，并隨缺氧時間增加呈時間效應(yīng)關(guān)系(P<0.05)，相關(guān)分析證實VEGF蛋白表達(dá)與HIF-1α蛋白表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論：缺氧可以顯著增加卵巢癌細(xì)胞VEGF蛋白的表達(dá)，而HIF-1α是缺氧條件下介導(dǎo)VEGF蛋白表達(dá)的重要轉(zhuǎn)錄因子。 2.沙利度胺對缺氧下人卵巢癌SKOV3細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)影響及機(jī)制。 目的：根據(jù)第一節(jié)實驗結(jié)果選擇合適的缺氧模型條件，進(jìn)一步研究沙

6、利度胺對缺氧下體外培養(yǎng)人卵巢癌SKOV3細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的影響及機(jī)制。 方法：建立SKOV3細(xì)胞體外缺氧培養(yǎng)模型，給予不同濃度沙利度胺處理12小時，再進(jìn)行缺氧處理16小時后，使用免疫熒光染色半定量分析SKOV3細(xì)胞HIF-1α及VEGF蛋白表達(dá)變化，使用RT-PCR 測定VEGF mRNA表達(dá)情況。 結(jié)果：免疫熒光半定量結(jié)果顯示常氧及缺氧情況下不同濃度沙利度胺均可明顯抑制HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá)(P<0.0