同電荷介質(zhì)促進(jìn)EGFP包含體復(fù)性的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、蛋白質(zhì)復(fù)性是基因工程產(chǎn)品生產(chǎn)過程重要的環(huán)節(jié)。針對蛋白質(zhì)復(fù)性過程中的聚集問題，本文利用本課題組開發(fā)的同種電荷介質(zhì)輔助蛋白質(zhì)復(fù)性的方法，開展同電荷介質(zhì)輔助綠色熒光蛋白(EGFP)包含體的復(fù)性的研究。
　　利用分散聚合反應(yīng)制備單分散聚甲基丙烯酸縮水甘油酯(pGMA)微球(2.4μm)，然后對微球表面的環(huán)氧基開環(huán)，接枝聚合GM A觸須式長鏈，增加p GMA微球表面的環(huán)氧基的密度，通過控制接枝聚合反應(yīng)，制備不同接枝量的微球，然后對微球表面修

2、飾帶負(fù)電荷的磺酸基，得到的最高的(pGMA-[GMA-SO3-]n3)介質(zhì)的離子交換容量達(dá)到793μmol/g，約是未進(jìn)行接枝聚合直接修飾磺酸基得到的(pGMA-SO3-)介質(zhì)的2.8倍。
　　利用本實(shí)驗(yàn)室凍存的含重組質(zhì)粒 pET28 a-EGFP的大腸桿菌表達(dá) EGFP包含體，用不同電荷密度的帶負(fù)電的微球用于促進(jìn)EGFP包含體復(fù)性，結(jié)果表明，復(fù)性收率及復(fù)性速率均隨著電荷密度的增大而提高，且同電荷介質(zhì)抑制蛋白質(zhì)聚集的作用與尿素具有

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