飲食限制誘導細胞自噬及其對老齡大鼠壽命的影響.pdf

1、第一部分血漿必需氨基酸濃度與細胞自噬程度相關性分析
　　 目的：探索血漿必需氨基酸的濃度對細胞自噬程度的影響。
　　 方法：老齡大鼠按體重隨機分為A組(正常飲食對照組)、B組(1天自由飲食1天禁食)、C組(5天自由飲食2天禁食)三組(每組15只)。飼養(yǎng)三個月后活體狀態(tài)下取1mm3肝臟組織4℃保存；心臟采血，經(jīng)抗凝、離心、去蛋白后取上清液-70℃保存。透射電鏡觀察各組肝臟細胞自噬泡的數(shù)量；高效液相色譜法(HPLC)檢測各組

2、血漿必需氨基酸含量；Spearman秩相關分析兩者之間的相關性。
　　 結果：纈氨酸濃度與細胞自噬程度的相關性最大(r=-0.779，P＜0.001)；賴氨酸的相關性最小(r=-0.517，P＜0.01)；苯丙氨酸、蛋氨酸和亮氨酸與細胞自噬程度的相關系數(shù)分別為-0.566、-0.527和-0.531(P＜0.01)；其余氨基酸的濃度與細胞自噬程度無相關性。
　　 結論：某些血漿必需氨基酸的濃度和細胞自噬的程度呈負相關，其

3、中纈氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、亮氨酸和賴氨酸的濃度對細胞自噬的程度影響較大。通過調(diào)節(jié)血漿氨基酸的水平來調(diào)控細胞自噬程度將是細胞自噬在臨床應用中的一個方向。
　　 第二部分細胞自噬在飲食限制抗衰老效應中的作用研究
　　 目的：觀察老齡大鼠在不同的飲食限制方式下肝臟細胞自噬水平和大鼠生存時間，分析二者之間的關系。
　　 方法：分組同前，飼養(yǎng)三個月后取標本，高效液相色譜法(HPLC)檢測各組血漿必需氨基酸含量；透射電鏡觀

4、察各組肝臟細胞自噬泡的數(shù)量；RT-PCR檢測MAP1-LC3mRNA表達；術后繼續(xù)飼養(yǎng)大鼠，記錄生存時間，繪制生存曲線。
　　 結果：兩飲食限制組與對照組相比5種血漿必需氨基酸濃度明顯降低，肝臟細胞的自噬程度明顯增強，大鼠生存時間明顯延長，差異有統(tǒng)計學意義。而兩飲食限制組間比較差異均無統(tǒng)計學意義。關聯(lián)分析顯示大鼠生存時間和肝臟細胞自噬水平高度正相關(r=0.842，P＜0.01)。
　　 結論：通過降低血漿氨基酸濃度增強